3XFLAG Пептид CAS 402750-12-3

3XFLAG Пептид CAS 402750-12-3

Код товару: BM-2-4-130
Номер CAS: 127103-11-1
Молекулярна формула: C20H33N5O9
Молекулярна маса: 487,5
Номер EINECS: /
Номер MDL: MFCD00076849
Код Hs: /
Analysis items: HPLC>99,0%, LC-MS
Основний ринок: США, Австралія, Бразилія, Японія, Німеччина, Індонезія, Великобританія, Нова Зеландія, Канада тощо.
Виробник: BLOOM TECH Changzhou Factory
Технологічна служба: НДДКР-4
Використання: чистий API (активний фармацевтичний інгредієнт) лише для наукових досліджень
Доставка: доставка як іншої нечутливої ​​назви хімічної сполуки

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. є одним із найдосвідченіших виробників і постачальників пептиду 3xflag cas 402750-12-3 у Китаї. Ласкаво просимо до оптової оптової торгівлі високоякісним пептидом 3xflag cas 402750-12-3 для продажу тут з нашої фабрики. Хороший сервіс і доступні ціни.

 

Пептид 3XFLAGє важливою послідовністю пептидного маркера, яка широко використовується в експресії білка та процесах очищення в біомедичних дослідженнях. Молекулярна формула C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Складається з 23 амінокислот, його послідовність містить три повторювані мотиви Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp, які надають йому специфічних структурних особливостей.

 

Має хорошу розчинність у специфічних розчинниках. Наприклад, у ДМСО його розчинність висока, що робить його зручним для операцій і експериментів у розчині. Крім того, він також може досягти хорошого ефекту розчинення у воді шляхом легкого нагрівання. Він також має деякі особливі властивості. Наприклад, він має хорошу антигенність і реактивність і може зв’язуватися зі специфічними антитілами до FLAG. Ця здатність до зв’язування робить його широко застосовним у таких експериментах, як імунопреципітація. Завдяки конкурентному зв’язуванню з антитілами проти FLAG злитий експресований білок FLAG, який зв’язується з антитілами проти FLAG, можна елюювати під час імунопреципітації, таким чином досягаючи локалізації, виявлення та очищення цільового білка.

Індивідуальні кришки та пробки для пляшок:

3XFLAG Peptide | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

3XFLAG Peptide | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

3XFLAG Price List  | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

3XFLAG Price List  | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Хімічна формула

C120H169N31O49S

Точна маса

2860

Молекулярна маса

2862

m/z

2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%)

Елементний аналіз

C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12

Applications

Пептид 3XFLAGце тег, який використовується в дослідженні білків і складається з 8 амінокислот із послідовністю DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Його основна функція — служити маркером для експресії та очищення білка, забезпечуючи зручний та ефективний засіб у дослідженнях.

3XFLAG Buy | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

1. Афінне очищення:

Його можна використовувати як мітку для очищення білка, і завдяки його високій спорідненості з антитілами проти FLAG цільовий білок можна легко очистити. Зазвичай цільовий білок спільно трансфікують у клітини вектором експресії, що містить 3X FLAG PEPTIDE, а потім очищають за спорідненістю з використанням антитіл проти FLAG для швидкого й ефективного отримання цільового білка високої чистоти.

2. Імунологічне дослідження:

Завдяки високій імуногенності його можна використовувати для визначення експресії та локалізації білка. Використовуючи специфічні антитіла до FLAG, можна виконати такі експериментальні методи, як імуноблотінг та імунофлуоресцентне фарбування, щоб швидко й точно визначити рівень експресії та розподіл цільових білків.

3XFLAG Cost | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Clone | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

3. Фільтрація клонів:

Його також можна використовувати для зручності скринінгу білкових клонів. У процесі конструювання векторів експресії білка з’єднання генної послідовності цільового білка з послідовністю 3XFLAG може сприяти скринінгу позитивних клонів з цільовим білком за допомогою імунної детекції та іншими методами, тим самим прискорюючи процес дослідження функції білка.

4. Імунопреципітація:

Його також можна використовувати для експериментів з імунопреципітації білка. Зв’язуючи білки, що містять 3X FLAG PEPTIDE мітки, з антитілами до FLAG, а потім використовуючи адсорбційні матеріали, такі як протеїн A/G агароза або магнітні кульки, цільовий білок і його взаємодіючі партнери можуть бути вибірково осаджені з клітинних екстрактів для вивчення мережі взаємодії білка.

3XFLAG Immunoprecipitation | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Drug | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

5. Скринінг на наркотики:

Його також можна використовувати в дослідженнях скринінгу наркотиків. Поєднуючи тег 3X FLAG PEPTIDE з цікавим білком, можна досягти високої-пропускної здатності скринінгу білка. Цей метод скринінгу можна використовувати для виявлення нових мішеней ліків, оцінки взаємодії ліків з білками тощо.

6. Дослідження функції білка:

Введення міток суттєво не впливає на природну структуру та функцію білків, тому може бути використане для вивчення біологічних функцій, субклітинної локалізації, взаємодій та передачі сигналу білків. Завдяки впровадженню мітки 3X FLAG PEPTIDE можна- проводити поглиблені дослідження біологічних характеристик білків, що допомагає виявити механізми їхньої дії в клітинній біології та фізіології.

3XFLAG Protein | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Manufacturing Information

Пептид 3XFLAGявляє собою пептид, що містить 8 амінокислот, з послідовністю DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Він зазвичай використовується як білкова мітка для зручного очищення, виявлення та дослідження цільових білків. У процесі біосинтезу його можна отримати за допомогою хімічного синтезу або методів генної інженерії. Нижче наведено детальні етапи методів генної інженерії:

 

1. Конструювати та синтезувати гени:

По-перше, необхідно створити штучний ген, що містить послідовність 3X FLAG PEPTIDE. Цей ген повинен містити послідовність 3X FLAG PEPTIDE, а також відповідні промотори, термінатори та маркери відбору (такі як гени стійкості до антибіотиків). Дизайн генів повинен враховувати характеристики та потреби експресії цільового господаря.

 

2. Клонування генів:

Далі створені штучні гени будуть клоновані у відповідні вектори експресії. Зазвичай використовувані вектори включають плазміди, вірусні вектори тощо. Процес клонування зазвичай включає такі етапи:

-ПЛР-ампліфікація: використання полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) для ампліфікації послідовності цільового гена з матричної ДНК.

-Перетравлення та з’єднання: продукти ПЛР розщеплюються векторами експресії за допомогою ендонуклеаз рестрикції, а потім з’єднуються за допомогою ДНК-лігаз.

-Трансформація: трансформація пов’язаного вектора експресії в бактеріальних хазяїв, таких як Escherichia coli, з утворенням рекомбінантної плазміди.

-Ідентифікація: рекомбінантні плазміди ідентифіковано за допомогою ПЛР, розщеплення ферментами, секвенування ДНК та інших методів, щоб підтвердити, що цільовий ген успішно клоновано у вектор.

 

3. Цільовий білок експресії:

Трансфікуйте сконструйований вектор експресії в цільові клітини-господарі, такі як клітини ссавців, клітини дріжджів, клітини комах тощо. У клітинах вектор експресії транскрибується в мРНК, а потім транслюється в білки. 3X FLAG PEPTIDE буде експресуватися разом із цільовим білком у вигляді білкової мітки.

 

4. Екстракція білка:

Зберіть трансфіковані клітини та виконайте фрагментацію клітин, центрифугування та інші види обробки для отримання загального білкового екстракту.

 

5. Очищений білок:

Використовуючи методи афінної очистки, такі як імунопреципітація та афінна хроматографія, цільові білки, що містять 3X FLAG PEPTIDE tags, очищали від загального екстракту. Зазвичай це передбачає зв’язування антитіл проти FLAG з білками, що містять 3X FLAG PEPTIDE, а потім їх розділення за допомогою колонок афінної хроматографії або магнітних кульок.

 

6. Визначте білки:

Очищений білок було ідентифіковано та визначено кількісно за допомогою SDS-PAGE гель-електрофорезу, імуноблотингу, мас-спектрометрії та інших технологій, щоб переконатися в його чистоті та цілісності.

 

Побічні реакції

У біомедичних дослідженнях та експериментах, пов’язаних з білками, пептиди-мітки відіграють вирішальну роль. Вони можуть допомогти дослідникам у очищенні, виявленні та локалізації цільових білків, значно сприяючи розвитку білкової науки.Пептид 3XFLAGє поширеним і широко використовуваним пептидом мітки, що складається з трьох повторюваних послідовностей мітки FLAG. Тег FLAG спочатку був розроблений Хоппом та ін. у 1988 році, а пізніше розвинувся у такі варіанти, як 3XFLAG, які мають високу спорідненість і специфічність і можуть зв’язуватися зі специфічними антитілами, полегшуючи подальшу ізоляцію та ідентифікацію. Незважаючи на те, що 3XFLAG приніс багато зручностей в експериментах, як і інші біологічні агенти, він також може викликати деякі побічні реакції.

Імунні побічні реакції

3XFLAG Immunogenicity | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Імуногенність

Імуногенність означає здатність речовини стимулювати імунну систему організму виробляти імунну відповідь. 3XFLAG, як сегмент екзогенного пептиду, може розпізнаватися імунною системою організму як «невласний» компонент, таким чином запускаючи імунну відповідь. Хоча послідовність 3XFLAG є відносно короткою, у деяких випадках вона може активувати В-клітини та Т-клітини, що призводить до вироблення антитіл. Ці антитіла не тільки зв’язуються з вільним 3XFLAG, але також можуть розпізнавати та зв’язуватися з злитими білками, що експресують мітку 3XFLAG, впливаючи на нормальну функцію та розподіл злитого білка.

Алергічні реакції

Алергічна реакція — це аномальна імунна відповідь, викликана надмірною чутливістю імунної системи до певних алергенів. Окремі люди можуть відчувати алергічні реакції при використанні 3XFLAG для експериментів або лікування. Виразність симптомів алергічних реакцій різна. Легкі випадки можуть проявлятися місцевими симптомами, такими як свербіж, висип і еритема, тоді як важкі випадки можуть викликати системні алергічні реакції, такі як анафілактичний шок, що характеризується різким падінням артеріального тиску, утрудненим диханням і втратою свідомості, що становить серйозну загрозу безпеці життя.

3XFLAG Allergic | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Reactions | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Алергічні реакції

Механізм алергічних реакцій в основному пов'язаний з антитілами IgE в імунній системі. Коли організм вперше контактує з 3XFLAG, імунна система розпізнає його як алерген і стимулює В-клітини виробляти специфічні антитіла IgE. Ці антитіла IgE прикріплюються до поверхні тучних клітин і еозинофілів. Коли організм знову контактує з 3XFLAG, він зв’язується з антитілами IgE на поверхні клітин, запускаючи тучні клітини та еозинофіли до вивільнення біоактивних медіаторів, таких як гістамін і лейкотрієни, що призводить до появи алергічних симптомів.

Ризик аутоімунних захворювань

Тривалий або повторний вплив 3XFLAG може збільшити ризик розвитку аутоімунних захворювань. Аутоімунні захворювання — це тип захворювання, при якому імунна система організму помилково атакує власні тканини й органи, що призводить до пошкодження тканин і функціональних порушень. 3XFLAG може спонукати імунну систему виробляти перехресно реактивні антитіла та Т-клітини за допомогою механізму молекулярної симуляції, де його амінокислотна послідовність подібна до послідовності певних білків у самому організмі.

3XFLAG Diseases | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Cells | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

 

Ці імунні клітини та антитіла не тільки атакують чужорідний 3XFLAG, але й ненавмисно пошкоджують нормальні тканини організму, що призводить до аутоімунних захворювань. Наприклад, певні аутоімунні захворювання, такі як системний червоний вовчак і ревматоїдний артрит, можуть бути пов’язані з аутоімунними реакціями, викликаними екзогенними речовинами. Хоча наразі немає чітких доказів того, що 3XFLAG безпосередньо викликає аутоімунні захворювання, цей потенційний ризик не можна ігнорувати.

Вплив на функцію клітин

 

цитотоксичність

У деяких експериментальних дослідженнях було виявлено, що високі концентрації 3XFLAG можуть мати токсичну дію на клітини. Прояви цитотоксичності включають зміни в морфології клітин, порушення цілісності клітинної мембрани, зміни активності внутрішньоклітинних ферментів і пригнічення клітинної проліферації. Його механізм дії може бути пов’язаний із взаємодією між 3XFLAG і клітинною мембраною. Завдяки сильному негативному заряду 3XFLAG,

3XFLAG Cytotoxicity | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Comoinents | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

він може зв’язуватися з позитивно зарядженими компонентами клітинної мембрани через електростатичну взаємодію, змінюючи проникність і текучість клітинної мембрани, що призводить до витоку внутрішньоклітинних речовин або потрапляння шкідливих речовин ззовні, тим самим впливаючи на нормальні фізіологічні функції клітини. Крім того, 3XFLAG також може проникати всередину клітин, перешкоджати сигнальним шляхам, синтезу білка та іншим процесам, ще більше посилюючи пошкодження клітин.

Вплив на клітинні сигнальні шляхи

3XFLAG може перешкоджати внутрішньоклітинним сигнальним шляхам і впливати на нормальну фізіологічну діяльність клітин. Клітинний сигнальний шлях – це загальний термін для серії молекулярних подій, під час яких клітини реагують на зовнішні подразники, регулюючи такі важливі процеси, як клітинний ріст, диференціація та апоптоз. 3XFLAG може заважати нормальній передачі сигнальних шляхів, взаємодіючи з ключовими молекулами в сигнальному шляху, змінюючи активність або рівні експресії сигнальних молекул.

3XFLAG Pathways | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Receptors | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Наприклад, він може зв’язуватися з рецепторами на поверхні клітини, конкурентно пригнічуючи зв’язування природних лігандів з рецепторами та блокуючи передачу сигналу; Крім того, він може проникати в клітину і зв’язуватися з білками трансдукції сигналу, впливаючи на фосфорилювання, дефосфорилювання білка та інші процеси модифікації, перешкоджаючи передачі та посиленню сигналу. Це втручання в клітинні сигнальні шляхи може призвести до клітинної дисфункції, впливаючи на такі процеси, як клітинна проліферація, диференціація та апоптоз, що, у свою чергу, може мати несприятливий вплив на нормальний розвиток і функцію тканин і органів.

Вплив на клітинний метаболізм

Клітинний метаболізм – це загальний термін для серії хімічних реакцій, які відбуваються в клітинах, забезпечуючи енергетичну та матеріальну основу для життєдіяльності клітини. 3XFLAG може впливати на клітинні метаболічні процеси, перешкоджати виробництву клітинної енергії та синтезу речовин. Наприклад, він може впливати на функцію мітохондрій, які є основними місцями аеробного дихання та виробництва енергії в клітинах. 3XFLAG може змінювати проникність і потенціал мітохондріальної мембрани шляхом взаємодії з білками або ліпідами на мембрані, впливаючи на функцію дихального ланцюга мітохондрій і синтез АТФ,

3XFLAG Metablism| Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
3XFLAG Leading | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

призводить до недостатнього енергозабезпечення клітин. Крім того,Пептид 3XFLAGтакож може перешкоджати внутрішньоклітинним процесам, таким як метаболізм глюкози та ліпідів, впливаючи на баланс синтезу та розкладання речовин у клітинах, а також негативно впливаючи на нормальні фізіологічні функції клітин

Часті запитання
 
 

Що таке 3X FLAG?

+

-

Пептид 3X FLAG є синтетичним пептидом із 23 амінокислотних залишків. Мотив Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp повторюється тричі в пептиді. Вісім амінокислот на C-кінці складають класичну послідовність FLAG (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).

Яка різниця між тегом flag- і 3xflag?

+

-

Flag-tag — це одна послідовність із 8 амінокислот, яка зазвичай використовується в імунопреципітації, вестерн-блоттингу та імунофлуоресценції. На відміну від цього, 3x Flag-tag містить 22 амінокислоти, що надає йому більшої спорідненості з анти-Flag антитілами та робить його особливо вигідним для робочих процесів очищення білка.

Як розчинити 3X FLAG?

+

-

Щоб приготувати основний розчин, розчиніть у TBS (50 мМ Tris-HCl, pH 7,4, з 150 мМ NaCl) у концентрації 5 мг/мл. Аліквотувати та зберігати при –20 градусах. Повторне заморожування і розморожування не рекомендується.

 

Популярні Мітки: 3xflag peptide cas 402750-12-3, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продаж

Послати повідомлення