Таблетка IGF 1 LR3

Основний компонентТаблетка IGF 1 LR3IGF-1 LR3 (Long R3-IGF-1) — це штучно синтезований аналог інсуліноподібного фактора росту-1, який зазвичай використовується в наукових дослідженнях або в медичних закладах у формі ін’єкцій. Це одноланцюговий лужний поліпептид, що складається з 70 амінокислот, які в основному синтезуються печінкою та регулюються гормоном росту (GH). Його структура подібна до інсуліну, але його ростостимулююча активність значно вища, ніж у інсуліну. Він активує вихідні сигнальні шляхи (такі як AKT і MAPK), зв’язуючись із рецепторами типу тирозинкінази (IGF-1R), сприяючи клітинній проліферації, диференціації та метаболічній регуляції. Як добавка до зростання, IGF-1 LR3 значно збільшує швидкість проліферації та виробництво рекомбінантного білка HEK293, CHO та інших клітин, і широко використовується в біофармацевтичній промисловості. У моделях трансгенних мишей LR3 використовується для вивчення розвитку м’язів, метаболічної регуляції та механізмів старіння. Наприклад, довгострокова ін'єкція LR3 може затримати атрофію м'язів і поліпшити рухові здібності літніх мишей.

IGF 1 LR3 COA

IGF-1 LR3 (довголанцюговий інсуліноподібний фактор росту людини) — це високоактивний пептид, який був штучно модифікований. Завдяки модифікації амінокислотної послідовності на основі людського IGF-1 він значно підвищує біологічну стабільність і активність і має важливе значення для застосування в таких сферах, як біомедичні дослідження та розробки, культура клітин тощо. ВиробництвоТаблетка IGF 1 LR3(довго{0}}людський інсулін-як таблетки з фактором росту) — це складна системна інженерія, яка об’єднує численні галузі технологій, як-от генна інженерія, процеси виготовлення та контроль якості

Процес виробництва таблеток IGF-1 LR3 можна розділити на три основні етапи: підготовка сировини, формування рецептури, покриття та пакування. Кожна стадія включає кілька тонких хімічних процесів і вимагає суворого контролю параметрів процесу для забезпечення однорідності якості продукції.

Підготовка сировини: генно-інженерна експресія та очищення

IGF-1 LR3, як пептидну речовину, не можна ефективно виробляти у великих масштабах шляхом хімічного синтезу. Основний метод полягає у використанні технології рекомбінантної експресії генної інженерії для приготування, і його процес досяг зрілої трансформації від лабораторних дрібномасштабних випробувань до пілотних випробувань у 150-літровому ферментаційному резервуарі. Конкретні кроки такі:

Побудова системи вираження

Пріоритет має бути наданий використанню еукаріотичних систем експресії із широко використовуваним штамом Pichia pastoris GS115 як клітиною-господарем. Використовуючи технологію рекомбінації ДНК, молекулу нуклеїнової кислоти, що кодує IGF-1 LR3, було клоновано в плазміду pPICZ A для конструювання вектора експресії pPICZ-LR3IGF-1. Вектор повинен містити такі елементи, як промотори та селективні маркерні гени (такі як гени стійкості до зеоцину), щоб забезпечити стабільну експресію цільового гена. Деякі компанії також використовують систему експресії E. coli, наприклад продукти Wuhan Pronosai, які досягають експресії цільових білків через E. coli.

Бродіння високої щільності

Процес бродіння є ключовим для виробництва сировини, і необхідно досягти періодичної ферментації з підживленням у 10-150 л ферментаційних резервуарах. Оптимізовані базові параметри — об’єм інокуляції 4% і концентрація IPTG 0,8 ммоль/л. Індукційний метод передбачає зв’язування лактози та ІПТГ, час індукції 4 години. Під час процесу бродіння розчинений кисень контролюється на рівні 40% -60%, а значення pH підтримується стабільним. Після 12 годин бродіння вага вологих бактерій може досягати 22-24 г/л, а рівень експресії цільового білка становить 25% від загального білка. Під час процесу ферментації необхідний моніторинг у реальному часі таких параметрів, як бактеріальна біомаса, розчинений кисень, рН тощо, щоб підтримувати поживні речовини через автоматичну систему живлення та уникати накопичення метаболітів, які пригнічують експресію білка.

Бактеріальна фрагментація та обробка тілець включення

Після ферментації бактеріальні клітини збирали центрифугуванням і оброблювали ультразвуком, щоб розщепити клітини, вивільняючи тільця включення, що містять цільовий білок. Щоб підвищити чистоту тілець включення, потрібні три градієнтні промивки. Спочатку промийте двічі 2 моль/л сечовини, а потім промийте один раз буфером PBS. Після обробки частка цільового білка в тільцях включення може бути збільшена до 50%. Згодом тільця включення розчиняли в денатуруючому розчині (pH 8,0), що містив 8 моль/л сечовини, 0,1 моль/л трис-HCl і 10 ммоль/л DTT, щоб забезпечити повне розгортання білка та підготуватися до подальшого повторного згортання.

Ренатурація та очищення білка

Для повторного згортання використовується метод розведення, і найбільш прийнятною формулою розчину для повторного згортання є 0,1 моль/л трис-HCl, 1 ммоль/л EDTA, 3 ммоль/л окисленого глутатіону, 1 ммоль/л відновленого глутатіону та 1% гліцину (pH 8,0). Після розведення білок перемішують при 4 градусах протягом 12 годин, щоб сприяти правильному згортанню. У процесі очищення використовується комбінований процес хроматографії. Спочатку невеликі молекулярні домішки видаляють за допомогою гель-хроматографії Sephadex G -50, а потім додатково очищають за допомогою іонообмінної хроматографії SP - Sepharose F. F. Нарешті, отримано високочистий білок IGF-1 LR3. Його молекулярна маса та амінокислотна послідовність повністю відповідають теоретичному значенню через виявлення.

Приготування ліофілізованого{0}}порошку

Очищений білок обробляється за допомогою-технології сублімації, і вода безпосередньо сублімується з твердого стану в газ за низької температури та низького тиску, утворюючи стабільний білий кристалічний порошок. Цей процес гарантує, що білки залишаються активними під час зберігання та транспортування. Ліофілізований порошок можна стабільно зберігати протягом кількох тижнів при кімнатній температурі та кілька років при -80 градусах.

Формування рецептури: ключовий процес приготування таблеток

Пептидні властивостіТаблетка IGF 1 LR3роблять його чутливим до середовища шлунково-кишкового тракту, а композиції таблеток повинні вирішувати такі проблеми, як низька біодоступність і сприйнятливість до ферментативного розкладання. Тому потрібна цілеспрямована оптимізація при розробці рецептів і виборі процесу. Процес формування його рецептури відноситься до загального процесу пептидних таблеток і регулюється відповідно до його власних характеристик, а саме:

1

 

Розробка рецепта та скринінг допоміжних речовин

Розробка рецепта повинна враховувати стабільність білка, швидкість розчинення та здатність до формування. Як розчинники слід використовувати мікрокристалічну целюлозу та лактозу у співвідношенні приблизно 3:1, щоб забезпечити твердість таблетки та полегшити розчинення; Для адгезиву використовується 5% водний розчин полівінілпіролідону K30, щоб уникнути пошкодження білкової структури органічними розчинниками; Вибраним розпушувачем є перехресно зв’язана карбоксиметилцелюлоза натрію з додаванням 3%-5%, щоб забезпечити швидкий розпад таблетки в шлунково-кишковому тракті; В якості мастила використовується стеарат магнію, з дозуванням 0,5%, для зменшення тертя при стисненні; Одночасне додавання 1% -2% меглюміну як солюбілізатора для покращення розчинності у воді IGF-1 LR3.

2

 

Дроблення і просіювання

Подрібніть ліофілізований порошок IGF-1 LR3 і допоміжні речовини окремо через дробарку з повітряним потоком, контролюючи розмір частинок D90 сировини на рівні 20-30 мкм і відповідаючи розмір частинок допоміжних речовин із сировиною, щоб уникнути нерівномірного змішування через різницю в розмірах частинок. Після подрібнення пропустіть через сито 80 меш, щоб видалити злиплі частки та домішки, забезпечуючи плинність матеріалу.

3

 

Змішування та гранулювання

Сирий матеріал IGF-1 LR3 спочатку змішували з розчинником і дезінтегрантом, використовуючи рівномірний поступовий метод протягом 30 хвилин, щоб забезпечити рівномірну дисперсію сировини. Згодом додавали полівінілпіролідоновий адгезив K30 і проводили мокре гранулювання з використанням поворотного гранулятора (сито 16 меш) для гранулювання. Вологі частинки слід сушити при температурі 40-45 градусів протягом 2-3 годин, з контрольованим вмістом вологи 3% -5%. Необхідно суворо контролювати температуру сушіння, щоб уникнути денатурації білка під дією високих температур. Після сушіння частинки просівають через сито 20 меш для видалення великих частинок і дрібного порошку.

4

 

Пресування таблеток

Виберіть неглибоку увігнуту матрицю діаметром 8 мм для пресування таблеток із контрольованою силою пресування 18-20 кН, твердістю таблетки, що підтримується на рівні 60-80Н, і різницею маси таблетки, контрольованою в межах ± 3%. Під час процесу пресування таблеток необхідний моніторинг маси, твердості та крихкості таблетки в режимі реального часу з відбором проб і тестуванням кожні 15 хвилин, щоб уникнути дефектів якості, спричинених коливаннями параметрів обладнання. У той же час таблетковий прес повинен пройти асептичну обробку, а виробниче середовище повинно контролюватися в чистій зоні D-рівня з температурою 18-26 градусів і відносною вологістю 45% -65%.

5

 

Покриття

Щоб захистити IGF-1 LR3 від пошкодження шлунково-кишковими ферментами, використовується процес покриття тонкою плівкою. У розчині для покриття використовується попередня суміш OBA, розведена очищеною водою до концентрації 15% і покрита за допомогою ефективної машини для нанесення покриттів. Під час процесу нанесення покриття температуру повітря на вході слід контролювати на рівні 45-50 градусів, температуру повітря на виході на рівні 30-35 градусів, швидкість розпилення на рівні 5-8 мл/хв, а вага покриття має збільшитися на 2-3%. Поверхня таблеток, вкритих оболонкою, гладка, що може затримувати розчинення в шлунку, швидко вивільняти ліки в кишечнику та покращувати біодоступність.

 

Основне виробниче обладнання та функції

Виробниче обладнання дляТаблетка IGF 1 LR3охоплює кілька областей, таких як біологічне бродіння, формування рецептур, а також перевірка та тестування. Точність і стабільність обладнання безпосередньо впливає на якість продукції. Перелік конкретного обладнання та функції такі:

Популярні Мітки: планшет igf 1 lr3, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продаж