Liraglutide Powder CAS 204656-20-2

Ліраглутидний порошок, Молекулярна формула C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, молекулярна маса 1209,40. Це штучно синтезований ацильований глюкагон людини, як пептид-1 (GLP-1), з більш ніж 97% подібністю послідовності порівняно з природним GLP-1. Може бути розчинений у воді, етанолі та пропіленгліколі. 34-е положення лізину природної молекули GLP-1 замінюється аргініном, який не тільки зберігає і продовжує час зв'язування між продуктами ацилювання та білками, але й значно долає недоліку легкої деградації GLP. У звичайних умовах зберігання він виявляє хорошу стабільність, і його водний розчин може підтримувати фізичну та хімічну стабільність принаймні 2 роки.

Генетична токсичність: результати тесту Емеса наЛіраглутидний порошок, тест на хромосомну аберацію для лімфоцитів периферичної крові людини та тесту на мікронуклеус щурів були негативними.

Репродуктивна токсичність:

1. Щурів -чоловіків підшкірно вводили 0,1, 0,25 та 1,0 мг/кг/д ліраглютиду за 4 тижні до спаровування та під час спаровування. У дозі 1,0 мг/кг/добу родючість тварин чоловіків не впливала безпосередньо. Згідно з розрахунками AUC у плазмі крові, системне опромінення, що генерується цією додою, становило приблизно в 11 разів, ніж у впливі людини при максимальній рекомендованій дозі людини (MRHD). Підшкірна ін'єкція 1,0 мг/кг на щурів -жінок призвела до збільшення ранньої ембріональної смерті, видимого збільшення ваги та зменшення споживання їжі.

2. Починаючи з 2 тижнів до спаровування до 17 -го дня вагітності у щурів -самок, підшкірних ін'єкцій 0,1, 0,25 та 1,0 мг/кг/д ліраглютиду. Згідно з розрахунками AUC у плазмі крові, системна експозиція, що утворюється цими трьома дозами, становила приблизно 0,8, 3 та 11 разів перевищує вплив людини під MRHD відповідно. У групі дози 1 мг/кг/д відбулося незначне збільшення кількості ранніх ембріональних смертей. У всіх дозах було спостерігалось відхилення плода, ниркові та судинні зміни, нерегулярне окостеніння черепа та повний стан надмірної окостеніння. У дозі 1,0 мг/кг/д спостерігалися плямиста печінка та легке скручування ребер. Частота вад розвитку плода, що перевищує той самий період та історичний контроль, полягає в тому, що: орофарингеальні вади розвитку та/або стеноз при відкритті горла при дозі 01 мг/кг/д, а також пупкові дефекти при дозах 0,1 та 0,25 мг/кг/д.

6–18 -го дня вагітності кроликів підшкірно вводили з ліраглютидом у концентрації 0,01, 0,025 та 0,05 мг/кг/д. Згідно з розрахунками AUC у плазмі крові, системне опромінення вагітних кроликів було нижчим, ніж у людей під час MRHD. У всіх дозах вага плода зменшувалася, а загальна частота важких порушень плода зростала залежно від дози. У дозах 0,01 мг/кг/д (нирки, плечі та селезінки), більше або дорівнюють 0,01 мг/кг/д (очі та передні кінцівки), 0,025 мг/д (мозок, хвіст і хребці, великі кровоносні судини, сердечний шнур), більше або рівні 0,025 мг 0,05 мг/кг/добу (тім'яна кістка та великі кровоносні судини), частота вад розвитку перевищила сучасний та історичний контроль. Нерегулярні порушення окостеніння та/або скелета виявляються в черепі та комірі, хребетах і реберах, грудинах, тазу, куски, а плече та селезінки; Також видно незначна зміна скелета, залежна від дози. Вісцеральні відхилення зустрічаються у судинах, легенях, печінці та стравоході. Усі групи лікування показали подвійні частки або біфуркації жовчного міхура, але в контрольній групі не спостерігалося подібної ситуації.

201 Згідно з розрахунками AUC у плазмі крові, системне опромінення становило приблизно 0,8, 3 та 11 разів перевищує вплив людини під час MRHD. Період доставки більшості тварин у групі лікування був дещо затягнутий. Середня вага новонароджених у групі лікування була нижчою, ніж у контрольній групі. Жіночі щури в групі дози 1,0 мг/кг/д демонстрували поведінку крові та хвилювання під час пологів. Середня маса тіла щурів потомства F2 у групі лікування від народження до 14 -го дня після народження була нижчою, ніж у контрольної групи, але відмінності між групами не досягли статистичної значущості.

Ліраглутидний порошокє штучно синтезованим ацильованим глюкагом людини, як аналог Peptide-1 (GLP-1) з понад 97% подібності послідовності порівняно з природним GLP-1. Молекулярна структура ліраглютиду включає такі основні характеристики: 34-е положення лізину природної молекули GLP-1 замінюється аргініном, який не тільки зберігає і продовжує час зв'язування між продуктами ацилювання та білками, але й значно долає недостатню кількість деградації GLP; До 26-го лізину додавали додатковий бічний ланцюг жирної кислоти, що допомагає продовжити період напіввиведення продуктів ацилювання in vivo. Ці унікальні молекулярні зміни змусили делілаглутид виявити видатні ефекти в клінічному лікуванні, особливо при діабеті та втрату ваги.

Хімічні методи синтезування ліраглутиду в основному включають наступні кроки:

1. Синтез фрагмента

По -перше, розділіть весь ліраглутид на кілька сегментів, які, як правило, можна розділити на п’ять сегментів: від 1 до 4 -ї амінокислоти, від 5 до 10 -ї амінокислоти, 11 -го до 16 -го амінокислот, 17 -го по 24 -го амінокислоти та 25 -го - 31 -го амінокислоти. Кожен фрагмент синтезується окремо, що може знизити труднощі та вартість синтезу пептиду та підвищити ефективність синтезу.

Для синтезу кожного фрагмента зазвичай використовуються методи синтезу твердофази або рідкофазний синтез. Метод синтезу твердого фази передбачає підключення карбоксильних груп амінокислот до смоли, а потім послідовно додавання амінокислот до смоли послідовно і, нарешті, відрізання пептидів з смоли. Метод синтезу рідкої фази передбачає розчинення всіх амінокислот в органічному розчиннику, а потім конденсують їх послідовно, утворюючи пептидні фрагменти.

2. Реакція зчеплення

Виконайте реакцію з'єднання на 5 пептидних фрагментах, синтезованих на етапі 1, утворюючи повний ліраглутид. Реакція зчеплення може бути здійснена за допомогою хімічних або біологічних зв'язків, а специфічний метод може бути обраний відповідно до фактичних потреб.

У реакції з’єднання необхідно з'єднати аміно -групу кожного фрагмента з карбоксильною групою наступного фрагмента. Для цього зазвичай необхідно використовувати конденсаційні агенти, такі як DIC або BOP. Ці конденсаційні засоби можуть сприяти реакції між аміно та карбоксильними групами, утворюючи пептидні зв’язки. У реакції сполучення слід також звернути увагу на контроль умов реакції, таких як температура, значення рН та час реакції, щоб забезпечити плавний прогрес реакції.

3. Очищення та ідентифікація

Синтезований ліраглутид потрібно очистити та визначити, щоб забезпечити чистоту та якість продукту. Очищення зазвичай проводиться за допомогою таких методів, як високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) або електрофорез з подальшою ідентифікацією за допомогою мас-спектрометрії, ядерного магнітного резонансу та інших методів. За допомогою цих засобів можна гарантувати, що молекулярна вага та послідовність синтезованого продукту відповідають очікуванням, і немає домішок або залишків побічних продуктів.

4. Інші модифікації

Окрім вищезазначених етапів, іноді потрібні інші модифікації, такі як додавання або видалення захисних груп. Ці кроки також є важливими, оскільки вони можуть захистити активні групи в пептидах від знищення або виникають побічні реакції, покращуючи якість та вихід синтезованогоЛіраглутидний порошок.

Вищезазначені - це основні хімічні методи синтезу ліраглютиду, але, звичайно, деякі деталі та методи повинні бути відзначені в практичній роботі. Наприклад, вибір відповідної системи розчинника, контроль температури та рН та використання відповідних каталізаторів може вплинути на ефективність синтезу та якість продукції. Тому при практичній експлуатації потрібно здійснювати коригування та оптимізацію відповідно до конкретних обставин.

Ліраглутид (агоніст рецепторів GLP-1 тривалої дію) відіграє значну роль у лікуванні діабету. Для забезпечення його керованості якості необхідно встановити наукові та суворі аналітичні методи та провести систематичну перевірку для забезпечення надійності цих методів. Наступний аналіз проводиться з трьох аспектів: пункти перевірки, методи валідації та ключові контрольні точки.

Основні елементи перевірки та технічні вимоги

Специфічність

Мета: довести, що метод може відрізнити ліраглютид від домішок, продуктів деградації та допоміжних речовин.

Стратегія впровадження:

Хроматографія: Використовуйте HPLC-UV або UPLC-MS. За допомогою примусової деградації (наприклад, високої температури, опромінення світла, гідролізу кислоти), генерують продукти деградації та перевірити ступінь розділення основного піку та піку домішки (більше або дорівнює 1,5). Наприклад, у дослідженні моделі APOE-/- миші після окислення ліраглютиду продукти деградації (наприклад, аддукти мурашиної кислоти) повинні бути підтверджені хроматографічним аналізом для забезпечення ефекту поділу продуктів деградації з основного піку.

Спектроскопія: Використовуйте детектор КПК для порівняння ультрафіолетових спектрів основного піку та домішок та підтвердження чистоти піків.

Порожній контроль: Перевірте відсутність помилкових позитивних сигналів за допомогою зразків без ліраглутиду (наприклад, допоміжні розчини).

 

Точність

Мета: Щоб переконатися, що виміряні результати були близькими до справжнього значення, а швидкість відновлення контролюється в межах 98% - 102%.

Стратегія впровадження:

Стандартний тест на відновлення додавання: Додайте відому кількість опорної речовини до зразка з відомим вмістом ліраглутиду та вимірюйте швидкість відновлення. Наприклад, в аналізі рецептури додайте 0,5 мг/мл, 1,0 мг/мл та 1,5 мг/мл ліраглутиду до порожнього розчину допоміжного речовини, повторіть кожну концентрацію 3 рази та обчисліть середню швидкість відновлення.

Метод порівняння: Порівняйте з класичними методами (такими як титрування) або перевіреними методами (такими як методи фармакопеї), а відхилення результатів має бути менше або рівним 2%.

 

Точність

Мета: Оцінити ступінь близькості повторних результатів вимірювання, при цьому RSD менше або дорівнює 2%.

Стратегія впровадження:

Повторюваність: проведіть 6 послідовних вимірювань одного і того ж зразка тим самим аналітиком, тим самим інструментом та тією ж партією зразків та обчислити RSD.

Проміжна точність: обчисліть RSD, визначивши одну і ту ж партію зразків різними аналітиками, різними інструментами та різними датами. Наприклад, при визначенні вмісту ліраглутиду повторюваність RSD повинна бути меншою або дорівнює 1,5%, а проміжна точність RSD повинна бути меншою або дорівнює 2,0%.

Відтворюваність: спільна перевірка з декількома лабораторіями (наприклад, стандартними методами фармакопеї), RSD повинна відповідати принципам настанов.

 

Обмеження та обмеження кількісного визначення

Мета: Визначити мінімальну концентрацію, яку метод може виявити та кількісно оцінити ліраглутид.

Стратегія впровадження:

Метод співвідношення сигнал-шум: Визначте LOD із співвідношенням сигнал-шум 3: 1 та визначте LOQ із співвідношенням сигнал-шум 10: 1. Наприклад, у методі ВЕРХ-УВС LOD ліраглютиду може бути до 0,01 мкг/мл, а лок-0,05 мкг/мл.

Метод стандартної кривої: обчисліть LOD та LOQ за допомогою сигналів відповідей стандартних речовин з низькою концентрацією (наприклад, 0,1 мкг/мл - 1 UG/мл).

 

Лінійність

Мета: Довести, що сигнал відповіді пропорційний концентрації, при цьому r² більше або дорівнює 0,999.

Стратегія впровадження:

Тест на концентрацію градієнта: підготуйте 5-7 градієнтів концентрації (наприклад, 0,1 мг/мл - 2.0 мг/мл) стандартних розчинів, виміряйте площу піку або значення відповіді та намалюйте стандартну криву.

Залишковий аналіз: Перевірте, чи залишки розподіляються випадковим чином і систематичного відхилення немає.

 

Діапазон

Мета: Для визначення застосовного діапазону концентрації методу, як правило, 120% LOQ до верхньої межі лінійності.

Стратегія впровадження:

Визначення вмісту: діапазон встановлюється на рівні 80% - 120% від міченої кількості. Наприклад, діапазон визначення вмісту рецептури Liraglutide повинен бути 0,4 мг/мл - 1.2 мг/мл. Контроль домішок: Відповідно до настанови ICH Q3D, встановіть граничний діапазон домішок (наприклад, одиничні домішки менше або дорівнюють 0,5%, загальна домішка менше або дорівнює 2,0%).

Валідаційні документи та управління даними

01

План перевірки та звіт

Чітко визначте пункти перевірки, методи, стандарти прийняття та ненормальні процедури поводження. Наприклад, якщо точний RSD перевищує ліміт, необхідно дослідити несправності приладів або оперативні помилки.

Запишіть вихідні дані (такі як хроматограми, стандартні криві, таблиці обчислення швидкості відновлення) для забезпечення відстеження.

02

Розробка методу індикації стабільності

Для тестів на обов'язкову деградацію він повинен охоплювати окислення, опромінення світла, гідроліз тощо, щоб імітувати фактичні умови зберігання. Наприклад, ліраглутид розміщувався на 60 градусах протягом 48 годин, швидкість деградації повинен бути більшим або рівним 10% для перевірки здатності методу виявляти продукти деградації.

03

Дотримання нормативних норм

Дотримуйтесь ICH Q2 (R2), USP<1225>та Китайські вказівки GMP для забезпечення того, щоб пункти перевірки охоплювали основні показники, такі як специфічність та точність.

Для елементарного аналізу домішок він повинен відповідати ICH Q3D та USP<233>Вимоги, контроль за межами 1-класних елементів, таких як AS, CD та PB.

Популярні Мітки: Liraglutide Powder CAS 204656-20-2, постачальники, виробники, фабрика, оптова торгівля, купівля, ціна, масу, на продаж