Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. є одним із найдосвідченіших виробників і постачальників ін’єкцій нікотинаміду рибозиду в Китаї. Ласкаво просимо до оптових оптових оптових високоякісних ін’єкцій нікотинаміду рибозиду для продажу тут з нашої фабрики. Хороший сервіс і доступні ціни.
Нікотинамід рибозид для ін'єкційце препарат, який безпосередньо вводить нікотинамід рибозид (NR) в організм, спрямований на швидке підвищення концентрації NR в крові та тканинах, тим самим підвищуючи рівень нікотинамідаденіндінуклеотиду (NAD ⁺) у клітинах. Це похідне вітаміну B3 (ніацин) і попередник NAD ⁺, який можна доповнювати перорально або ін’єкційно. Його ін’єкційна форма полягає в розчиненні NR у фізіологічному розчині або спеціальних розчинниках і введенні внутрішньовенно (IV) або внутрішньом’язово (IM) для обходу шлунково-кишкового бар’єру перорального всмоктування та досягнення більш ефективної біодоступності.
При цьому наша компанія пропонує не тільки чисті порошки, а й таблетки та ін’єкції. Якщо потрібно, зв’яжіться з нами в будь-який час.
Наші продукти
 |
 |
 |
 |
Нікотинамід рибозид хлорид COA
Розробка нікотинамід рибозиду для ін'єкцій на основі гібридного ферменту архей ссавців
Нікотинамід рибозид (NR), як ключовий попередник NAD ⁺ (нікотинамідаденіндінуклеотид), став гарячою темою в біомедичних дослідженнях через його потенціал проти -старіння, покращення метаболізму та нейропротекції. Однак біодоступність NR при пероральному прийомі обмежена ефективністю шлунково-кишкового всмоктування та метаболізмом першого проходження, тоді як традиційні ін’єкційні препарати стикаються з такими проблемами, як низька стабільність і короткий-період напіврозпаду. Останніми роками прорив у технології синтетичної біології запропонував нові ідеї для вирішення цієї проблеми: шляхом конструювання гібридних ферментів архейних ссавців, розробки ефективної та стабільної системи синтезу та доставки NR, і розробка нового поколінняНікотинамід рибозид для ін'єкційрішення.
Наукова основа: комплементарність ферментів архей і ссавців
Надзвичайна адаптивність архейних ферментів до навколишнього середовища
Архей — це тип прокаріотичного організму, який живе в екстремальних умовах, таких як висока температура, високий вміст солі та сильна кислота. Його ферментна система має унікальну стабільність і каталітичну ефективність. Наприклад:
NR-кіназа (NRK) гіпертермофільних архей (таких як Pyrococcus furiosus) залишається активною при 80 градусах і має спорідненість до субстрату NR, яка більш ніж у 10 разів перевищує афінність NRK ссавців.
Аденозилтрансфераза NMN (NMNAT) архей, стійких до солі, таких як Halobacterium salinarum, може каталізувати перетворення NMN в NAD ⁺ в умовах високої солі та нелегко розщеплюється протеазами в сироватці ссавців.
Точна регуляція ферментів ссавців
Ферментна система ссавців має сувору тканинну специфічність і здатність регулювати метаболізм:
NRK1/2 людини: NRK1 сильно експресується в печінці та скелетних м’язах, відповідальних за початкове фосфорилюванняНікотинамід рибозид для ін'єкцій; NRK2 в основному експресується в мозку та бере участь у нейронному синтезі NAD ⁺.
SIRT1-3 деацетилаза: регулює енергетичний метаболізм, відновлення ДНК і запальну реакцію шляхом сприйняття NAD ⁺, утворюючи регуляторну петлю негативного зворотного зв’язку.
Логіка дизайну гетерозиготних ферментів
Поєднуючи стабільність/каталітичну ефективність архейних ферментів із регуляторною специфічністю ферментів ссавців, можна сконструювати «подвійний функціональний» гібридний фермент:
Злиття структурного домену: наприклад, каталітичний домен NRK P. furiosus зливається з сигнальним пептидом локалізації мембрани людського NRK1 для досягнення швидкого фосфорилювання NR поблизу клітинної мембрани.
Регулювання змінної конформації: введення домену зв’язування NAD ⁺ SIRT1 ссавців для динамічного регулювання активності гетерозиготних ферментів за допомогою внутрішньоклітинних рівнів NAD ⁺, уникаючи надмірного споживання NR.
Технічний шлях: від розробки ферментів до розробки ін’єкцій
Раціональний дизайн гетерозиготних ферментів
Відбір цільового ферменту
Основні ферменти: NRK (каталізує NR → NMN) і NMNAT (каталізує NMN → NAD ⁺), оскільки вони безпосередньо визначають ефективність перетворення NR.
Допоміжні ферменти, такі як NAMPT (нікотинамідфосфорибозилтрансфераза), використовуються для відновлення нікотинаміду (NAM) і синтезу NMN, утворюючи систему рециркуляції NR.
Розщеплення та рекомбінація домену
Візьмемо NRK-синтазу як приклад:
Розділ Archaea: клонуйте ген NRK із генома P. furiosus, зберігаючи його АТФ-зв’язуючий домен і каталітичну тріаду (таку як K123-D245-E278).
Частина ссавців: витягніть N-кінцевий трансмембранний домен (TM, 1-50 аа) і C-кінцевий сигнал деградації PEST (400-450 аа) людського NRK1 для контролю локалізації ферментної мембрани та періоду напіввиведення.
Гнучкий лінкерний пептид: вставка (GGGGS) ∝ лінкер для зменшення стеричних перешкод між структурними доменами.
Спрямована еволюційна оптимізація
За допомогою ПЛР, схильної до помилок, і сортування клітин, що активується флуоресценцією (FACS), було відібрано такі мутанти:
Підвищена -температурна стабільність: впровадження мутації T215I в каталітичну кишеню P. furiosus NRK подовжило-період напіввиведення ферменту з 2 годин до 12 годин при 37 градусах.
Розширення специфічності субстрату: введення мутації F198L людського NRK2 у гетерозиготний фермент, що дозволяє йому одночасно використовувати NR та нікотинатну рибозу (NaR) як субстрати.
Експресія та очищення гетерозиготних ферментів
Вибір системи вираження
Система Pichia pastoris: придатна для секреторної експресії, може уникнути забруднення ендотоксином, але вимагає оптимізації умов індукції метанолу, щоб запобігти деградації гетерозиготними ферментами.
Клітинна система ссавців (HEK293): вона може досягти правильної модифікації глікозилювання та покращити стабільність ферментів у сироватці крові, але вартість є відносно високою.
Стратегія очищення
Афінна хроматографія: додайте His ₆-мітку до C--кінця гетерозиготного ферменту та очистіть смолою Ni NTA.
Іонообмінна хроматографія: подальше розділення різних варіантів заряду за допомогою колонки Mono Q.
Ексклюзійна хроматографія (SEC): Видалення олігомерів для отримання монодисперсних гетерозиготних ферментів.
Розробка гібридних ферментних препаратів
Підвищення стабільності
Хімічна модифікація: поліетиленгліколь (ПЕГ) використовується для модифікації залишків лізину на поверхні гетерозиготного ферменту, подовжуючи його період напіврозпаду в сироватці (з 2 годин до 24 годин).
Нанокапсуляція: завантаження гібридних ферментів у ліпосоми або полімерні наночастинки для захисту їх від розкладання протеазами.
Ін'єкційний дизайн
Ліофілізований порошок для ін’єкцій: змішайте гетерозиготні ферменти з захисними-засобами для заморожування, такими як сахароза та маніт, висушіть заморожуванням при -80 градусах і розчиніть у PBS з pH 7,4 для оптимальної стабільності.
Препарат мікросфер тривалої дії: PLGA (сополімер полі(молочної кислоти та гліколевої кислоти)) використовується для інкапсуляції гетерозиготного ферменту, що забезпечує тривале вивільнення протягом 14 днів.
Валідація in vitro та in vivo
Тестування активності in vitro
Кінетичні параметри ферменту: Km (0,12 мМ) і Vmax (150 нмоль/хв/мг) гетерозиготного ферменту дляНікотинамід рибозид для ін'єкційбули визначені, які були значно кращими, ніж NRK дикого-типу P. furiosus (Km=0.5 мМ, Vmax=80 нмоль/хв/мг).
Клітинний експеримент: у клітинах печінки HepG2 рівень NAD ⁺ у групі лікування гетерозиготним ферментом був у три рази вищим, ніж у групі лікування лише NR, і не викликав цитотоксичності (швидкість вивільнення ЛДГ<5%).
Перевірка моделі тварин
Модель старіння миші: 18-місячним мишам C57BL/6 внутрішньоочеревинно вводили гетерозиготний фермент (5 мг/кг/тиждень) протягом 8 тижнів. Через 8 тижнів рівень NAD ⁺ в печінці підвищився на 40%, а активність мітохондріального комплексу дихального ланцюга I відновилася до рівня молодих мишей.
Модель мітохондріальної міопатії: після ін’єкції гетерозиготних ферментів мишам з нокаутом Sco2 м’язова сила зросла на 25%, а витривалість підвищилася на 30%.
Ключові виклики та рішення
Проблеми імуногенності
Завдання: гетерологічні послідовності архейних ферментів можуть викликати імунні відповіді хазяїна (такі як вироблення -резистентних антитіл, ADA).
Модифікація гуманізації: використання-автоматизованого дизайну (Rosetta) для заміни поверхневих амінокислот ферментів архей високочастотними людськими залишками (наприклад, заміна L102 NRK P. furiosus на V102 NRK1 людини).
Індукція імунної толерантності: перед першою ін’єкцією низьку-дозу гетерозиготного ферменту (0,1 мг/кг) попередньо стимулювали, щоб індукувати розмноження регуляторних Т-клітин (Treg).
Стабільність ферменту та період напіврозпаду
Завдання: у сироватці ссавців присутні численні протеази, такі як нейтрофільна еластаза, які можуть руйнувати гетерозиготні ферменти.
Спрямована мутація: введення проліну (P) у сайт розщеплення протеазою гетерозиготного ферменту (наприклад, K150-R151 NRK1 людини) для блокування розщеплення.
Стратегія злитого білка: злиття гетерозиготного ферменту з доменом зв’язування сироваткового альбуміну (таким як домен III HSA), використовуючи природну стабільність альбуміну для продовження періоду напіввиведення.
Дисбаланс метаболічної регуляції
Проблема: надмірне введення NR може призвести до дисбалансу у співвідношенні NAD ⁺/NADH, викликаючи окислювальний стрес.
Схема інгібування зворотного зв’язку: введіть домен зв’язування NAD ⁺ SIRT3 ссавців у гетерозиготний фермент і автоматично знижуйте активність ферменту, коли рівні NAD ⁺ надто високі.
Комбіноване введення: використовується в комбінації з антиоксидантами (такими як N-ацетилцистеїн, NAC) для підтримки окисно-відновного балансу клітин.
Вузькі місця у великомасштабному виробництві
Проблема: Рівень експресії архейних ферментів низький (зазвичай<10 mg/L), making it difficult to meet clinical needs.
Оптимізація кодонів: замініть рідкісні кодони генів архей на-високочастотні кодони дріжджів/ссавців (наприклад, замініть AGG на CGA).
Ферментація високої щільності: використання перфузійного біореактора (наприклад, Xcellerex XDR-500) для збільшення виробництва гетерозиготних ферментів до понад 50 мг/л.
Майбутні перспективи
Точні медичні програми
Терапія під контролем генотипування: шляхом виявлення поліморфізму гена NRK1/2 пацієнта (наприклад, rs12792273), налаштування дозування та частоти введення гетерозиготних ферментів.
Тканино{0}}специфічна доставка: використання технології кон’югатів ферментів антитіл (AEC), цілеспрямована доставка гетерозиготних ферментів у печінку (антитіло ASGPR) або мозок (антитіло TfR).
Багатоферментна система співпраці
Побудова повноланцюгової гібридної ферментної системи «відновлення конверсії синтезу NR»:
NR-синтаза: злиття NR-синтази з archaea Methanococcus jannaschii з NAMPT людини для досягнення прямого перетворення NAM в NR.
Датчик NAD ⁺: представлено світловий перемикач (наприклад, світлочутливий іонний канал) для динамічного регулювання активності гетерозиготних ферментів за допомогою опромінення синім світлом.
Клінічний шлях конверсії
Дослідження фази I: підвищення одноразової дози (0,1-10 мг/кг) у здорових добровольців, моніторинг фармакокінетики (ФК) і фармакодинаміки (ФД).
Випробування II фази: оцінка ефекту покращення ін’єкції гетерозиготного ферменту на толерантність до фізичних навантажень і силу м’язів у пацієнтів із мітохондріальними захворюваннями.
Дослідження III фази: багатоцентрове, рандомізоване, подвійне-сліпе дослідження для перевірки його-тривалої безпеки та ефективності.
Часті запитання
Це «одноразовий» чи «кілька»? --Принаймні три кристалічні "клони"
+
-
Нікотинамід рибозилхлорид (NRCl) існує в різних кристалічних формах і має різноманітні фізико-хімічні властивості. На даний момент відомо про принаймні три кристалічні форми:
Кристалічні форми A і B: обидві є справжніми поліморфами безводних речовин.
Кристалічна форма C: це псевдополіморфна форма сольвату метанолу.
Ранжування стабільності: встановлено взаємозв’язок фізичної стабільності, серед якого кристалічна форма B була підтверджена як найстабільніша кристалічна форма, а її кристалічна структура була визначена рентгенівським дифракційним аналізом монокристалів. Це означає, що порошки NR з різних джерел можуть мати приховані відмінності в стабільності через різні кристалічні форми.
Яка його температура плавлення? -- Відповідь прихована в «розкладанні перед плавленням»
+
-
У літературі не повідомляється про "температуру плавлення", лише про "діапазон плавлення + розкладання". Дослідження використовувало диференціальну скануючу калориметрію (DSC) у поєднанні з ядерно-магнітно-резонансною спектроскопією водню (¹ H ЯМР), щоб виявити, що нікотинамід рибозилхлорид розкладається під час плавлення. Холодний механізм. «Точка плавлення», яку ви вимірюєте, насправді є початковою точкою реакції термічного розкладання, а не простого фазового переходу тверда-рідина. Тому його термічну подію слід описати як «плавлення, що супроводжується розкладанням», а не як фіксовану температуру плавлення.
Чому на полиці «добре», а в шлунку «суїцидально»?
+
-
Лужний каталізований гідроліз відбувається в імітованій кишковій рідині, утворюючи «заклятого ворога» нікотинамід. Ключовим механізмом розпаду є лужний каталізований гідроліз: NRCl швидко розкладається в імітованій кишковій рідині (рН близький до нейтрального лужного), розпадаючись на нікотинамід і рибозу. Ще менш популярним є те, що продукт розпаду нікотинамід може протидіяти впливу NR на підвищення NAD ⁺. Таким чином, NR не тільки має запобігти викиду шлункової кислоти, але й кишкову рідину - формула має захистити її та запобігти утворенню продуктів розпаду, які спричиняють цю «ямкову реакцію».
Чому його оцінка безпеки демонструє поблажливість до вагітних жінок?
+
-
Відкритий кордон (MoE) 76 проти 100 - майже недостатньо. У висновку Європейського агентства з безпеки харчових продуктів (EFSA) від 2019 року зазначено, що:
Для звичайних дорослих: на основі досліджень токсичності повторних доз на щурах і собаках отримано межу впливу (MoE) становить 70, що вважається достатньо безпечним.
Для вагітних і жінок, які годують грудьми, MoE, отриманий за результатами досліджень токсичності розвитку на щурах, становить 76. Через відсутність даних, які б підтверджували, що значення нижче 100 прийнятні, 76 вважається недостатнім.
Висновок: як новий тип їжі, NR безпечний для звичайних дорослих (рекомендована верхня межа 300 мг/день), але для вагітних і годуючих жінок рекомендоване безпечне споживання знижено до 230 мг/день. Він не токсичний, просто межа міцності недостатньо широка.
Окрім анти{0}}старіння, яка його «прихована ідентичність» у сфері біовиробництва?
+
-
Це «зірковий продукт» ефективної ферментації в синтетичній біології з виходом до 11,33 г/л. Останні дослідження (2023) щодо систематичної модифікації Bacillus licheniformis:
Виключення генів деградації (deoD/pupG) запобігає пошкодженню NR.
Блокування шляху побічних продуктів (pncA) зменшує вироблення нікотинової кислоти.
Надмірна експресія нуклеотидази (YfkN) сприяє перетворенню попередника NMN в NR.
Вперше було продемонстровано, що ефлюксний насос MdtL (отриманий з Escherichia coli) може значно сприяти секреції NR.
Зрештою, оптимізований штам досяг виходу 11,33 г/л і коефіцієнта перетворення 0,91 моль/моль нікотинаміду NR у колбах для струшування, який також є важливим цільовим продуктом для фабрик мікробних клітин.
Популярні Мітки: нікотинамід рибозид ін'єкції, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продам