Ізотіоціанат флуоресцеїнуПомаранчевий червоний, ізотіоціанат флуоресцентний жовтий, ізотіоціанат флуоресцентний червоний, ізоміоціанат флуоресцеїновий ізомер I, 5- ізотіоціанат флуоресцеїн. Жовтий порошок. Це гігроскопічно. Він може зв'язуватися з різними білками антитіл, а антитіло після зв'язування не втрачає специфічності зв'язування з певним антигеном. Він все ще має сильну зелену флуоресценцію в лужному розчині. Після додавання кислоти вона осаджує, а флуоресценція зникає. Він трохи розчинний у ацетоні, ефірі та нафтовому ефірі. Це біохімічний реагент, а також медичний діагностичний препарат, який може швидко діагностувати захворювання, спричинені бактеріями, вірусами, паразитами тощо. Крім того, він може зв'язуватися з різними білками антитіл, а антитіло після зв'язування не втрачає специфічності зв'язування з певним антигеном, і все ще є сильним зеленим флуоресценцією в алкаліновому розчині. Після додавання кислоти вона осаджує, і флуоресценція зникає, і вона трохи розчинна в ацетоні, ефірі та нафтопродукт.
|
Хімічна формула |
C21H11NO5S |
|
Точна маса |
389 |
|
Молекулярна вага |
389 |
|
m/z |
389 (100.0%), 390 (22.7%), 391 (4.5%), 391 (2.5%), 391 (1.0%), 392 (1.0%) |
|
Елементальний аналіз |
C, 64.78; H, 2.85; N, 3.60; O, 20.54; S, 8.23 |
|
|
|
Вивчення властивостейІзотіоціанат флуоресцеїнуПозначений інсуліном для амінування желатину та його застосування в введенні слизової оболонки:
За умови відсутності зовнішнього емульгатора водний розчин амінування желатину диспергували в оливковій олії, а новий тип позитивно заряджених мікросфери гель, амінування мікросфери желатину, готували через процеси емульгування, гебування, зневоднення та зшивання. Середній розмір частинок мікросфер становить 40-50 мкм. Розмір рівномірно розподіляється. Висушені мікросфери можуть поглинати приблизно в 20 разів власної ваги води для утворення гідрогелів. Аміновані мікросфери желатину мають більш високий вміст аміно, ніж мікросфери желатину. Вони позитивно заряджаються в дистильованому буферному розчині з водою та фосфатами, а потенціал ZATA у дистильованій воді - 41,5 мВ.
Зі збільшенням концентрації глутаральдегіду або розширенням часу зшивання реакції вміст аміно в мікросферах зменшувався. Однак, незалежно від умов реакції зшивання, аміновані мікросфери желатину, приготовані цим методом, мають більш високий вміст аміно, ніж мікросфери желатину. Аміномірований желатиновий мікросфери можна швидко деградувати (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20 год) у пепсині та кислотному середовищі. Взаємодія між амінованими мікросферами желатину та муцином сильніша, ніж між мікросферами желатину. Висока позитивна щільність заряду мікросфери амінування желатину є основною причиною його сильної взаємодії з муцином. Біоадгезивні властивості мікросфери амінування желатину вивчали методом маркування флуоресценції та технологією деградації ферментів in vitro, використовуючи ізольовану модель промивання перфузії шлунка щурів та експерименту in vivo у щурів.
The results showed that under the same experimental conditions, the number of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach was more than that of gelatin microspheres, and the type of irrigation solution (artificial gastric juice or PH7 human phosphate buffer) had no significant effect on the gastric retention of microspheres, which indicated that the electrostatic interaction between the microspheres and gastric mucus was not the decisive factor для утримання шлунка мікросфер у цій моделі. Однак в експерименті було встановлено, що кількість мікросфери амінування желатину, що зберігається в ізольованому шлунку щурів, зменшується зі збільшенням концентрації зшивання агента глутаральдегіду при готуванні мікросфер, яка вказувала на те, що адгезія шлункової оболонки шлунка може вплинути на зміст амінованого беатіну, що має ступінь ганкера.
Експериментальні результати in vivo у щурів показали, що аміно -желатинові мікросфери мали кращу адгезію слизової оболонки, ніж мікросфери желатину. Вплив амінування желатину на носове поглинання глюкану та інсуліну досліджували у здорових щурів. Результати показали, що 0. 2% (WN) аміно -желатин може значно сприяти поглинанню глюкану флуоресцеїну ізотіоціанату від слизової носа щурів з біодоступністю 23,8%. Після інтраназального введення 10 МО фосфатного буфера інсуліну, що містить 0 2% (мас.
Ізотіоціанат флуоресцеїну(FITC), як класичний флуоресцентний реагент, став незамінним інструментом у сферах біології, медицини та матеріалознавства завдяки його високому квантовому виходу, відмінній фотостабільності та хорошій біосумісності.
Група ізотіоціанатів (- n=C=S) FITC може зазнавати ковалентних реакцій з активними групами, такими як аміно та тиолі в біомолекулах, утворюючи стабільні флуоресцентні маркування. Ця характеристика робить його кращим реагентом для білка, нуклеїнової кислоти та маркування пептиду.
Маркування білка та функціональні дослідження
FITC досягає конкретного маркування шляхом зв'язування з залишками лізину білків, таких як антитіла та лектини. Наприклад, в експериментах з імунофлуоресценцією антитіла з міченими FITC можуть зв'язуватися з клітинними поверхневими антигенами та кількісно аналізувати рівні експресії антигену за допомогою флуоресцентної мікроскопії або проточної цитометрії. Експериментальні дані показують, що інтенсивність флуоресценції кон'югату FITC IgG лінійно пов'язана з концентрацією антигену, і чутливість до виявлення може досягти рівня Данака. Крім того, білки з міченими FITC також можуть бути використані для досліджень взаємодії білка, таких як аналіз конформаційних змін білків за допомогою технології флуоресцентної резонансної передачі (FRET).
Мітка нуклеїнової кислоти та молекулярна гібридизація
FITC може бути хімічно модифікований для позначення 5 'або 3' кінця нуклеїнових кислот на технологію флуоресценції in situ гібридизації (FISH). У дослідженні раку мічені зонди FITC можуть спеціально зв'язуватися з хромосомними аномальними областями для сприяння діагностиці гематологічних захворювань, таких як лейкемія та лімфома. Наприклад, зонди FITC, орієнтовані на гени злиття BCR-ABL, можуть відображати жовті флуоресцентні сигнали в ядрах міжфазних клітин зі швидкістю точності понад 95%.
Позначення пептидів та доставка ліків
Пептиди, позначені FITC, відіграють важливу роль у системах доставки ліків. Входячи з прикладу M2PEP-FITC, ця молекула складається з пептиду M2PEP-пептиду та флуоресцентної групи FITC, яка може спеціально розпізнати рецептори поверхні клітин пухлин та досягти цільової доставки лікарських засобів. Експерименти показали, що накопичення M2PEP-FITC, позначених ліпосомами в тканинах пухлини, в 3,2 рази більше, ніж у вільних препаратах, значно покращуючи терапевтичну ефективність та зниження побічних ефектів.
Властивості флуоресценції FITC роблять його "золотим стандартом" у сфері діагностики in vitro, широко застосовуються в таких методах, як імунохроматографія, проточна цитометрія та ІФА.
Швидке виявлення збудників
Мітлені антитіла FITC можна використовувати для швидкої діагностики бактеріальних, вірусних та паразитарних інфекцій. Наприклад, при діагностиці малярії, антитіла до малярії, позначені FITC, пов'язані з мазком крові пацієнта, а зелений сигнал флуоресценції паразита спостерігається за допомогою флуоресцентної мікроскопії. Час виявлення скорочується від 2 годин традиційними методами до 15 хвилин, а чутливість досягає 98%. Крім того, зонди нуклеїнової кислоти FITC також можуть бути використані для виявлення нуклеїнових кислот дихального вірусу, таких як ген ORF1AB SARS-COV -2, із специфічністю 99,2%.
Пухлинні маркери
В проточній цитометрії,Ізотіоціанат фуоресцеїнуМітлені антитіла проти CD45 можуть відрізнити клітини лейкемії від нормальних клітин крові. Дані показують, що позитивна швидкість міченого антитіла CD34 FITC у діагностиці гострого мієлоїдного лейкемії (AML) на 85%, що на 20% вище, ніж традиційне морфологічне обстеження. Щодо раннього скринінгу пухлин, технологія виявлення циркулюючих пухлинних клітин FITC (CTC) може захоплювати пухлинні клітини в надзвичайно низьких концентраціях периферичної крові, забезпечуючи новий метод ранньої діагностики солідних пухлин, таких як рак молочної залози та рак легенів.
Діагностика аутоімунних захворювань
У технології ELISA позначені аутоантитіла (такі як анти -ядерні антитіла та антитіла проти подвійних навантажених ДНК) можуть бути використані для діагностики таких захворювань, як системний червоний вовчак (СКВ). Експерименти показали, що FITC-ELISA має чутливість 92% та специфічність 95% для виявлення антитіл проти SM, що значно краще, ніж традиційні методи імунофлуоресценції.
Клітинна проникність та низька токсичність FITC роблять його ідеальним інструментом для візуалізації клітин, широко застосовується для локалізації органели, спостереження за клітинами та досліджень апоптозу.
Маркування клітинної органели та динамічне спостереження
Позначені мітохондріальними зондами FITC (наприклад, MitotRacker Green) можуть спеціально зв'язуватися з мітохондріальним мембранним потенціалом та контролювати мітохондріальні морфологічні зміни в режимі реального часу. У дослідженні нейронів, фітки, позначені білковими антитілами мікротрубочок, можуть відображати динамічне розширення конусів росту аксона, виявляючи механізм розвитку нейронного розвитку. Крім того, для вивчення процесів аутофагії також можна використовувати Lysotracker Green) Lysotracker Green), а також кількісно визначивши кількість аутофагосомів за допомогою змін інтенсивності флуоресценції.
Клітинний цикл та аналіз апоптозу
У проточній цитометрії мічений йодид пропію (PI) FITC може зв'язуватися з ДНК та відрізняти різні стадії клітинного циклу (G 0/G1, S, G2/M) шляхом інтенсивності флуоресценції. Експериментальні дані показують, що чутливість методу подвійного фарбування FITC-PI для виявлення клітинного апоптозу на 98%, що на 30% вище, ніж традиційний метод фарбування синього трипан. Крім того, FITC мітить зонди анексину V можуть спеціально зв'язуватися з фосфатидилсерином, що піддається впливу на поверхні апоптотичних клітин, досягаючи точної ідентифікації ранніх апоптотичних клітин.
Дослідження міграції клітин та інвазії
У Трансвелл-експериментах клітини з маркуванням FITC можуть контролювати процес міграції в режимі реального часу. Наприклад, у дослідженні метастазування пухлини швидкість міграції клітин раку молочної залози FITC (MCF -7) через матричний клей позитивно корелює з здатністю інвазії, забезпечуючи кількісні показники для скринінгу протипухлинних препаратів.
FITC відіграє численні ролі в розробці лікарських засобів, включаючи перевірку цілей, оцінку системи доставки лікарських засобів та фармакокінетичні дослідження.
Цільова перевірка та механізм досліджень дій
Для перевірки цілей наркотиків можна використовувати інгібітори малих молекул FITC. Наприклад, мічені інгібітори EGFR FITC (такі як гефітиніб) можуть продемонструвати зв'язування препаратів з рецепторами EGFR на поверхні пухлинних клітин, кількісно оцінюючи спорідненість зв'язування (значення KD) через інтенсивність флуоресценції. Крім того, позначена SiRNA FITC також може бути використана для вивчення ефективності замовчування генів, забезпечуючи основу для інтерференційної терапії РНК.
Оцінка системи доставки ліків
Наночастинки FITC (такі як ліпосоми та полімерні мікросфери) можуть контролювати поведінку розподілу та вивільнення лікарських засобів in vivo в режимі реального часу.
Експерименти показали, що накопичення фітків, позначених Pegylated Liposomes в пухлинних тканинах, в 2,8 рази більше, ніж у вільних препаратах, а сигнал флуоресценції може тривати протягом 24 годин, забезпечуючи візуальні дані для оптимізації систем доставки лікарських засобів.
Фармакокінетичні та токсикологічні дослідження
Молекули наркотиків, позначені FITC, можна кількісно проаналізувати на їх процес поглинання, розподілу, метаболізму та екскреції (ADME) in vivo за допомогою технології флуоресцентної візуалізації. Наприклад, інтенсивність флуоресценції антибіотиків, позначених FITC (наприклад, ванкоміцин) у нирках, лінійно пов'язана з концентрацією лікарських засобів, що забезпечує основу для оптимізації дозування лікарських засобів. Крім того, аналізи цитотоксичності, позначені FITC, також можуть оцінити пошкодження лікарських засобів у нормальних клітинах та керувати оцінками безпеки.
Характеристики флуоресценції FITC роблять його однозначно застосовним у галузі матеріалознавства, включаючи розробку датчиків рН, датчики температури та зонди іонів металів.
Датчик флуоресценції, що реагує на рН,
Інтенсивність флуоресценціїІзотіоціанат флуоресцеїну is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8. 0) флуоресценція гасить. Виходячи з цієї характеристики, модифіковані наночастинки FITC можуть бути використані для моніторингу внутрішньоклітинних кислотних коливань. Наприклад, інтенсивність флуоресценції комплексу білірибіну FITC при мікросередовищі пухлини в 2,3 рази перевищує нормальну тканину, що забезпечує новий метод діагностики пухлини.
Флуоресцентний зонд, що реагує на температуру
Час життя флуоресценції FITC змінюється з температурою. У умовах низької температури (4 градусів) тривалість флуоресценції мічених полімерних мікросфер FITC розширюється до 5,2 наносекунд, що в 1,8 рази вище, ніж кімнатна температура (25 градусів). Ця характеристика робить його ідеальним інструментом для вивчення фазових перехідних процесів та клітинної кріоконсервації.
Зонд виявлення іонів металу
FITC значно знижує інтенсивність флуоресценції в поєднанні з іонами металів, такими як Cu ² ⁺ та Hg ² ⁺, що робить його придатним для моніторингу навколишнього середовища. Наприклад, модифіковані наночастинки силікагелю FITC мають межу виявлення 0. 1 нм для Hg ² ⁺ у воді, що в 100 разів вище, ніж традиційна атомна спектроскопія поглинання.
Застосування FITC у сільськогосподарській галузі поступово розширюється, включаючи виявлення вірусів рослин, діагностику захворювань тварин та ідентифікація чистоти різноманітності.
Швидке виявлення рослинних вірусів
Антитіла до вірусу, позначені FITC, можуть бути використані для виявлення вірусу мозаїки тютюну (ТМВ), вірусу огіркової мозаїки (CMV) та інших вірусів. Експерименти показали, що чутливість FITC-ELISA для виявлення TMV 0. 1 нг/мл, що в 10 разів вище, ніж традиційні серологічні методи. Крім того, для виявлення екзогенних генів у генетично модифікованих культурах, таких як стійкі до комах, гени BT гени, мічені нуклеїновими кислотами, також можуть використовуватися для виявлення екзогенних генів.
Діагностика хвороб тварин
Мітлені антитіла FITC можуть бути використані для виявлення вірусу свиней (CSFV), вірусу пташиного грипу (AIV) та інших вірусів.
При діагностиці свиней лихоманки FITC позначені антитілами до CSFV, позначені антитілами CSFV з ділянками тканин та спостерігають розподіл вірусу за допомогою флуоресцентної мікроскопії, скорочуючи час виявлення від традиційних методів від 3 днів до 6 годин. Крім того, для виявлення специфічних Т -клітин, специфічних для патогенів, в крові тварин та оцінці інтенсивності імунної відповіді та оцінки інтенсивності імунної відповіді.
Ідентифікація чистоти різноманітності
Для ідентифікації чистоти сортів врожаю можна використовувати зонди з ДНК FITC. Наприклад, зонд FITC, орієнтований на ген стійкості до вибуху рису, може точно розрізняти гомозиготи та гетерозиготи в гібридному насінні рису, з точністю ідентифікації чистоти 99,5%. Крім того, молекулярні маркери SSR також можуть бути використані для аналізу генетичного різноманіття тваринництва та породи птиці, забезпечуючи наукову основу для розведення.
Синтез FITC: 4- Нітрофтальний ангідрид (див. C8H3NO5, [5466-84-2]) реагує з resorcinol при 195-200 ступінь C для 10 год, циклізується на суміш 3 'нітрофлуоресцеїну та 4' - nitrofluoresceceyce, Гідролізи з насиченим розчином етанолу гідроксиду натрію, отримують 4 "нітрофлуоресцеїну. Потім 4 ' - нітрофлуоресцеїн розчиняють у воді аміаку, реагують на нікель -рекшлет і гідразину при кімнатній температурі протягом 2 год, зменшується до 4' - амінореоресцеїну.Ізотіоціанат флуоресцеїну.
Putc Pure Produce - це жовтий або помаранчевий кристалічний порошок, який легко розчинний у розчиннику води та спирту. Існує два ізомери, серед яких ізомер типу I краще в ефективності, стабільності та зв'язуванні білка. Молекулярна маса FITC - 389,4, максимальна довжина хвилі поглинання - 490 ~ 495 нм, а максимальна довжина хвилі викиду - 520 ~ 530 нм, що демонструє яскраво -жовту зелену флуоресценцію. FITC може зберігатися протягом багатьох років у холодних, темних та сухих місцях, і є найбільш широко використовуваним флуоресцеїном. Основна його перевага полягає в тому, що людське око є більш чутливим до жовтого зеленого кольору, а зелена флуоресценція в зразку секції зазвичай менша, ніж червона.
Популярні Мітки: fluorescein ізотіоціанат Cas 27072-45-3, постачальники, виробники, фабрика, оптова торгівля, купівля, ціна, масова, для продажу