Флуоресцеїну діацетат(FDA), з молекулярною формулою C24H16O7, номер CAS 596-09-8, молекулярна маса 416,380, зазвичай виглядає як світло-жовтий порошок з хорошою кристалічністю. Розчинність в ацетоні відносно висока, досягаючи 25 мг/мл. Однак існує обмежена інформація про його розчинність в інших розчинниках, але зазвичай вважається, що на його розчинність впливають полярність розчинника та температура. Це ліпофільна сполука, яка може проникати через клітинну мембрану в живих клітинах і гідролізуватися як субстрат естерази для отримання флуоресцентного флуоресцеїну. Ця характеристика робить його широко застосовним у таких сферах, як виявлення життєздатності клітин, виявлення мікробів і оцінка активності ферментів. Сам він не випромінює світло, але флуоресцеїн, який утворюється в результаті гідролізу в живих клітинах, може випромінювати зелену флуоресценцію. Його довжини хвилі збудження та випромінювання становлять 488 нм та 530 нм відповідно, що робить його широко використовуваним флуоресцентним зондом у проточній цитометрії та інших інструментах біологічного виявлення.
|
|
|
|
Хімічна формула |
C24H16O7 |
|
Точна маса |
416 |
|
Молекулярна маса |
416 |
|
m/z |
416 (100.0%), 417 (26.0%), 418 (2.7%), 418 (1.4%) |
|
Елементний аналіз |
C, 69.23; H, 3.87; O, 26.90 |
Флуоресцеїну діацетат(FDA) — хімічна речовина, яка широко використовується в біології, медицині, екологічному моніторингу та промисловості.
Біологія та медичні дослідження
1. Виявлення життєздатності та активності клітин
(1) Аналіз проточною цитометрією: як субстрат естерази він може проникати в живі клітини через клітинну мембрану та гідролізуватися у флуоресцеїн естеразами всередині клітин, випромінюючи зелену флуоресценцію. Тому його часто використовують у проточній цитометрії для визначення життєздатності клітин і оцінки стану виживання клітин шляхом вимірювання інтенсивності флуоресценції.
(2) Оцінка цитотоксичності: у дослідженнях цитотоксичності її можна використовувати для оцінки впливу ліків, хімічних речовин тощо на активність клітин. Порівнюючи зміни інтенсивності флуоресценції клітин до і після обробки, можна визначити, чи мають ці речовини токсичну дію на клітини.
2. Виявлення та ідентифікація мікробів
(1) Виявлення мікробної активності: можна використовувати для виявлення мікробної активності в навколишньому середовищі, наприклад загальної мікробної активності в ґрунті. Вимірюючи інтенсивність флуоресценції, що утворюється в результаті гідролізу FDA мікроорганізмами, можна оцінити рівень активності мікроорганізмів.
(2) Виявлення бактерій і вірусів: у біологічних і медичних дослідженнях його також можна використовувати для виявлення присутності бактерій і вірусів. За допомогою спеціальних методів фарбування або маркування можна досягти швидкої ідентифікації та підрахунку бактерій і вірусів.
3. Виявлення біомаркерів та активності ферментів
(1) Оцінка активності ферментів: може використовуватися як субстрат для різних ферментів для оцінки їх активності. Наприклад, він може служити флуоресцентним субстратом для людської глутатіон S{2}}трансферази Pi (hGTP1-1), і його активність можна оцінити шляхом вимірювання інтенсивності флуоресценції.
(2) Виявлення біомаркерів: у діагностиці захворювань його можна використовувати для визначення присутності та рівня певних біомаркерів, таких як маркери ракових клітин. Рання діагностика та моніторинг лікування захворювань можуть бути досягнуті за допомогою спеціальних методів виявлення.
Екологічний моніторинг
1. Моніторинг якості води
(1) Виявлення мікроорганізмів у воді: можна використовувати для виявлення мікроорганізмів у воді, таких як живі цисти лямблій. Вимірюючи інтенсивність флуоресценції, спричинену гідролізом FDA мікроорганізмами у зразках води, можна оцінити мікробне забруднення якості води.
(2) Оцінка життєздатності водоростей: у моніторингу довкілля її також можна використовувати для оцінки статусу життєздатності водоростей у водоймах.
Вимірюючи здатність клітин водоростей поглинати та перетворювати їх на FDA, можна визначити стан росту та якість екологічного середовища водоростей.
2. Моніторинг ґрунтів
Мікробна активність ґрунту: як згадувалося раніше, його можна використовувати для вимірювання загальної мікробної активності ґрунту. Це має велике значення для оцінки стану здоров'я та рівня родючості ґрунтових екосистем.
Промислове застосування
1. Світлодіодне обладнання
Флуоресцентний матеріал: його можна використовувати як флуоресцентний матеріал у світлодіодних пристроях для перетворення та регулювання кольору світла шляхом поглинання світла, що випромінює світлодіод, і випромінювання різних кольорів флуоресценції.
2. Маркування масла
Флуоресцентний засіб для маркування: у нафтовій промисловості його можна використовувати як флуоресцентний засіб для маркування. Додаючи його до нафтопродуктів для надання їм флуоресцентних властивостей, він полегшує ідентифікацію та локалізацію в процесах виявлення витоків, відстеження та відновлення.
Інші програми
1. Вимірювання температури в медичних дослідженнях
Чутливий до температури зонд: властивості флуоресценції залежать від температури, тому його можна використовувати як чутливий до температури зонд у медичних дослідженнях. Вимірюючи зміни інтенсивності флуоресценції, можна-здійснювати моніторинг змін температури в умовах in vivo або in vitro в реальному часі.
2. Лікування ішемічних захворювань
Лікування ішемії: дослідження показали, що його можна використовувати для лікування ішемічних захворювань у певних ситуаціях. Завдяки своєму специфічному біохімічному механізму він може сприяти відновленню та ремонту ішемічних тканин.
Синтезфлуоресцеїну діацетат(FDA) — це складний, але важливий хімічний процес, і його продукти мають широке застосування в біології, медицині, моніторингу навколишнього середовища та інших галузях.
Синтез FDA зазвичай базується на флуоресцеїні або його сполуках-попередниках, які вводять групи оцтової кислоти через реакції етерифікації. Реакція естерифікації - це широко використовувана реакція органічного синтезу, яка зазвичай включає реакцію карбонової кислоти та спирту в присутності кислотного каталізатора для отримання естерів. Під час синтезу флуоресцеїн або його попередник (наприклад, діацетилфлуоресцеїн) реагує з оцтовим ангідридом, утворюючи речовину.
1. Підготовка сировини
Флуоресцеїн:
Як вихідний матеріал флуоресцеїн можна синтезувати або придбати різними методами.
Оцтовий ангідрид:
Як ацилюючий агент у реакціях естерифікації необхідно забезпечити чистоту та стабільність.
Каталізатори:
Такі, як піридин і сірчана кислота, використовуються для сприяння реакцій етерифікації.
розчинник:
Такі як безводний етанол, ДМСО тощо, які використовуються для розчинення реагентів і продуктів, сприяють рівномірному перебігу реакції.
2. Реакція етерифікації
(1) Умови реакції:
Зазвичай проводиться при певній температурі (наприклад, 90-120 градусів C) і тиску, щоб забезпечити ретельне змішування та реакцію реагентів.
(2) Етапи операції:
Розчиніть флуоресцеїн у відповідній кількості розчинника, додайте оцтовий ангідрид і каталізатор, рівномірно перемішайте, а потім нагрійте і кип’ятіть із зворотним холодильником протягом певного періоду часу (наприклад, кілька годин). Щоб забезпечити повну реакцію, необхідний постійний моніторинг ходу реакції.
(3) Постобробка:
Після завершення реакції неочищений продукт отримують за допомогою таких стадій, як фільтрування, промивання та сушіння. Потім було проведено очищення за допомогою таких методів, як перекристалізація та колонкова хроматографія, щоб отримати високо-чистий FDA.
3. Конкретні приклади синтезу
(1) Приготування флуоресцеїну:
По-перше, флуоресцеїн отримують за допомогою ряду хімічних реакцій. Цей процес може включати такі етапи, як плавлення, додавання хлориду цинку, реакція, затвердіння, охолодження, обробка кислотою, промивання, сушіння тощо.
(2) Реакція етерифікації:
Візьміть певну кількість флуоресцеїну (наприклад, 6,3 г, приблизно 0,02 моль), додайте відповідну кількість оцтового ангідриду (наприклад, 16 мл, приблизно в 5 разів більше теоретичної кількості) і каталізатора (наприклад, піридин), нагрійте до певної температури (наприклад, 90 градусів C) на масляній бані, перемішайте та рівномірно перемішайте. Потім поступово підвищуйте температуру до вищої температури (наприклад, 120 градусів C) і реагуйте протягом певного періоду часу (наприклад, 7 годин).
(3) Постобробка:
Після завершення реакції охолодити природним шляхом до кімнатної температури та відфільтрувати для отримання неочищеного продукту. Промийте та висушіть неочищений продукт для отримання готового продукту.
Безпечна експлуатація:
У процесі синтезу беруть участь токсичні та шкідливі хімічні речовини, такі як оцтовий ангідрид і піридин. Необхідно працювати у витяжній шафі та носити відповідне захисне спорядження (таке як захисні окуляри, лабораторні халати, рукавички тощо).
Контроль стану реакції:
Реакція етерифікації чутлива до температури, тиску, часу реакції та інших умов, тому потрібен суворий контроль для забезпечення плавної реакції та якості продукту.
Етапи очищення:
Етапи очищення під час пост-обробки мають вирішальне значення для отримання високо-продуктів чистоти. Необхідно вибрати відповідний метод очищення відповідно до фактичної ситуації та провести достатню обробку промивання та сушіння.
Щоб підвищити ефективність синтезу та чистоту продукту, метод синтезу можна оптимізувати. Наприклад:
(1) Поліпшення каталізаторів:
Вибір відповідних каталізаторів може збільшити швидкість і вихід реакцій етерифікації.
(2) Оптимізація умов реакції:
Шляхом регулювання температури реакції, тиску, часу та інших умов можна додатково підвищити чистоту та вихід продукту.
(3) Покращення методів очищення:
Застосування більш ефективних методів очищення (таких як хроматографічне розділення, мембранне розділення тощо) може покращити чистоту та швидкість відновленняФлуоресцеїну діацетат.
Які побічні дії цієї речовини?
Перевірка життєздатності клітин:
FDA широко використовується для тестування життєздатності клітин, оскільки він може проникати в живі клітини та розщеплюватися всередині клітин для створення флуоресценції, що дозволяє візуально оцінити стан життєздатності клітини.
Низька токсичність:
У звичайних концентраціях FDA має низьку токсичність для клітин і зазвичай не має значного негативного впливу на клітини.
Пошкодження клітин:
Якщо концентрація FDA занадто висока або час обробки занадто довгий, це може призвести до певного пошкодження клітин. Це може бути пов'язано з впливом FDA або продуктів його розпаду на проникність клітинних мембран або внутрішній метаболізм клітин.
Алергічні реакції:
У деяких осіб FDA може викликати алергічні реакції. Ця реакція зазвичай пов’язана з конституцією людини та станом імунної системи, але ймовірність її виникнення відносно низька.
Забруднення навколишнього середовища:
FDA має правильно поводитися з ним після використання, щоб уникнути потенційного забруднення навколишнього середовища та екосистеми.
Хоча FDA сам по собі не є дуже небезпечною хімічною речовиною, неправильне поводження з будь-якою хімічною речовиною може мати негативний вплив на навколишнє середовище.
Контроль концентрації:
При використанні FDA для тестування життєздатності клітин слід суворо контролювати концентрацію та час обробки, щоб уникнути непотрібного пошкодження клітин.
Індивідуальний захист:
Під час використання FDA оператори повинні носити відповідні засоби індивідуального захисту, такі як рукавички, маски та окуляри, щоб запобігти прямому контакту зі шкірою, очима чи дихальними шляхами.
Утилізація відходів:
Після використання розчини FDA слід належним чином утилізувати згідно з відповідними правилами, щоб гарантувати, що вони не спричиняють забруднення навколишнього середовища.
FAQ
Що таке флуоресцеїну діацетат?
Флуоресцеїн діацетат (FDA) визначається якефір жирної кислоти, який стає флуоресцентним після ферментативного гідролізу ацетилтрансферазами в живих мікобактеріальних клітинах, що дозволяє ідентифікувати життєздатні бацили в аналізах на життєздатність.
Для чого використовується флуоресцеїн?
Використовується ін’єкція флюоресцеїнущоб допомогти певним частинам ока (наприклад, сітківці, райдужній оболонці) стати більш видимими під час медичних процедур для очей. Цей препарат повинен призначатися лише вашим лікарем або під його прямим наглядом. Даний продукт випускається в наступних лікарських формах: Розчин.
Що таке аналіз флуоресцеїну діацетату?
Флуоресцеїну діацетат (FDA) євикористовується для визначення активності мікробів. Визначення цієї активності можна проводити в рамках різних об’єктів дослідження з використанням ґрунту, підстилки, торфу тощо. Цей метод заснований на реакції гідролізу перетворення флуоресцеїну діацетату (ФДА) у флуоресцеїн.
Популярні Мітки: флуоресцеїну діацетат кас 596-09-8, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продаж