Дигідроетідій, КАС номер 104821-25-2, молекулярна формула C21H21N3, з точною молекулярною масою 315,41, є важливою сполукою з великим біологічним застосуванням. Зазвичай він з’являється як тонкий кристалічний порошок, починаючи від рожевого до фіолетового. Цей унікальний колір полегшує розпізнавання в лабораторії та забезпечує природний флуоресцентний фон для його використання в якості флуоресцентного зонда. У хімічних та біологічних дослідженнях його часто використовують як зонд для виявлення реактивних видів кисню, особливо при виявленні внутрішньоклітинних аніонів супероксиду, що демонструє надзвичайно високу ефективність. Цей барвник може вільно входити в клітини та дегідрогенат, утворюючи бромід етидію. Цей зонд широко використовується в NK -клітинах і як важливий барвник для виявлення проліферації клітин та гіпоксії при пухлинах.
|
|
|
|
Хімічна формула |
C56H92O29 |
|
Точна маса |
1229 |
|
Молекулярна вага |
1229 |
|
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
|
Елементальний аналіз |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
Дигідроетідій, як синій флуоресцентний зонд, який може проникнути в клітини, відіграє важливу роль у галузях біології та медицини. Його унікальні властивості флуоресценції дозволяють йому виявляти рівні аніонів супероксиду (O2-) всередині клітин, тим самим виявляючи механізми реактивних видів кисню в клітинній фізіології та патології.
1. Зображення клітин
Дігідроетилен, як флуоресцентний зонд, може потрапляти в клітини і зв'язуватися з ДНК, випромінюючи червону флуоресценцію. Тому він широко використовується в технології візуалізації клітин для моніторингу окислювально -відновного статусу в клітинах у реальному часі-. Завдяки таким обладнанням, як флуоресцентна мікроскопія або проточна цитометрія, дослідники можуть спостерігати за розподілом та змінами дигідроетилендіаміну в клітинах, тим самим розуміючи окислювально -відновлювальну стан клітин у фізіологічних або патологічних станах.
2. Окислювально -відновлювальне виявлення
Властивості флуоресценції злиття етилен -дигідрогенів роблять його ідеальним інструментом для виявлення окислювально -відновного стану. У клітинах дигідроетилендіамін можна окислювати за допомогою супероксидних аніонів для утворення етилендіаміну, який потім зв'язується з ДНК і випромінює червону флуоресценцію. Тому, виявляючи інтенсивність флуоресценції дигідроетилендіаміну, рівень внутрішньоклітинних аніонів супероксиду може бути опосередковано відбивним, тим самим оцінюючи окислювально -відновлювальний стан клітин. Цей метод виявлення має переваги високої чутливості, специфічності та високої пропускної здатності -, що забезпечує потужний інструмент для вивчення динамічних змін статусу окислювально -відновлювального строку.
3. Дослідження пухлини
Дігідроетилен має широкий спектр застосувань у дослідженні пухлини. Через високий окислювально -відновлюючий рівень пухлинних клітин дигідроетилендіамін може слугувати ефективним маркером пухлини для ранньої діагностики та терапевтичної оцінки пухлин. Крім того, для вивчення біологічних процесів проліферації пухлинних клітин, апоптозу та інвазії, що забезпечує важливі підказки для розкриття механізмів виникнення та розвитку пухлини.
4. Обстеження наркотиків
Дігідроетилендіамін також відіграє важливу роль у скринінгу наркотиків. Багато препаратів, при цьому чинять терапевтичні ефекти, також впливають на окислювально -відновлювальну стан клітин. Тому, виявляючи інтенсивність флуоресценції дигідроетилендіаміну, можна оцінити вплив препаратів на клітинний окислювально -відновлювально -окислювально -відновлювальний стан та потенційні терапевтичні препарати можна обстежити. Крім того, для вивчення механізму взаємодії між препаратами та пухлинними клітинами може бути використаний дигідроетилендіамін, забезпечуючи сильну підтримку розвитку лікарських засобів та клінічного застосування.
5. Оцінка біобезпеки
Дігідроетилен також може використовуватися в галузі оцінки біобезпеки. Під впливом забруднювачів та токсинів навколишнього середовища, окислювально -відновлювально -окислювально -окислювально -окислювально -окислювально -відновлювального стану може змінюватися. Виявляючи інтенсивність флуоресценції дигідроетилендіаміну, вплив цих речовин на клітинний окислювально -відновлювальний стан можна оцінити, тим самим оцінюючи їх біологічну безпеку. Цей метод має велике значення для оцінки потенційних ризиків забруднювачів навколишнього середовища та забезпечення здоров'я людини.
Детальні етапи та відповідні хімічні рівняння для синтезудигідроетідійУ лабораторії є процес, що включає органічний хімічний синтез.
1. Підготовка сировини
Початкові матеріали: Виберіть відповідний вихідний матеріал, який може бути сполукою, що містить бензольне кільце та аміногрупа.
Розчинники та каталізатори: Виберіть відповідні розчинники (такі як етанол, метанол тощо) та каталізатори (такі як каталізатори перехідного металу) на основі типу реакції.
2. Реакція першого кроку: Вступ та модифікація бензольного кільця
Тип реакції: реакція заміщення або реакція з’єднання ароматичних вуглеводнів.
Конкретні етапи: при дії каталізатора вихідний матеріал реагується на відповідне бензольне кільце, що вводить реагенти (наприклад, фенілборонова кислота, галогенізований бензол тощо) для введення бензольної кільця.
Хімічне рівняння: Через невідому структуру конкретних реагентів та продуктів загальна формула використовується тут для представлення:
Початковий матеріал+бензольне кільце Вступ Реагент → Проміжний продукт 1
3. Реакція другого кроку: Вступ або модифікація аміногруп
Тип реакції: реакція амінації або реакція заміщення аміну.
Конкретні етапи: за відповідних умов реагувати проміжний продукт 1 з амінаційними реагентами (такими як аміни, азиди тощо) для введення або зміни аміногруп.
Хімічне рівняння:
Проміжний продукт 1+ Амінація реагент → Проміжний продукт 2
4. Реакція третього кроку: реакція гідрування
Тип реакції: реакція гідрування.
Конкретні етапи: За дією каталізаторів (таких як платина, паладій тощо) та водневого газу, проміжний продукт 2 гідрогенується для отримання дигідроетиленового зливу або його аналогів.
Хімічне рівняння:
Проміжний продукт 2+ H2 → Dihydroethylen Intot (або подібне)
5. Очищення та характеристика
Очищення: Очистіть продукт за допомогою таких методів, як перекристалізація та стовпчаста хроматографія.
Характеристика: Використання таких методів, як мас -спектрометрія, інфрачервона спектроскопія та ядерний магнітний резонанс для характеристики продукту та підтвердження його структури та чистоти.
Дигідроетідій(DHE) - це флуоресцентний зонд, широко використовується в біологічних дослідженнях. Його унікальні властивості флуоресценції дають йому значні переваги у виявленні внутрішньоклітинних реактивних видів кисню (особливо аніонів супероксиду). Далі наведено детальне вступ до властивостей флуоресценції етиленових дигідрогенних злитків:
Сам дигідроетилен - це нефлуоресцентна сполука, але коли вона потрапляє в клітини, його можна окислювати внутрішньоклітинними аніонами супероксиду (O ₂ ₂ ₂), тим самим перетворюючи в етилен. Етиленгліколь - це флуоресцентна сполука, яка може зв'язуватися з ДНК та РНК. Тому, коли дигідроетиленгліколь окислюється до етиленгліколю, він буде зв'язуватися з нуклеїновими кислотами в клітинах і випромінювати сильну червону флуоресценцію.
Існує значна зміна флуоресцентних спектральних характеристик дигідроетилових злитків до та після окислення. Коли не окислюється, сам дигідроетил злиття не випромінює флуоресценцію. Коли він окислюється до оксиду етилену, його максимальна довжина хвилі збудження зазвичай становить близько 488 нм або 530 нм, а його максимальна довжина хвилі викидів становить близько 610 нм. Це робить його сумісним із фільтрувальними системами загальних флуоресцентних мікроскопів або проточних цитометрів, полегшенням флуоресцентної візуалізації та кількісного аналізу.
Інтенсивність флуоресценції дигідроетилсульфату позитивно корелює з рівнем внутрішньоклітинних аніонів супероксиду. Коли концентрація внутрішньоклітинних аніонів супероксиду збільшується, більше дигідроетилендіаміну окислюється до етилендіаміну, який зв'язується з нуклеїновими кислотами та випромінює більш сильні сигнали флуоресценції. Тому, виявляючи інтенсивність флуоресценції дигідроетилендіаміну, рівень внутрішньоклітинних супероксидних аніонів може бути опосередковано відбивним.
Флуоресцентний комплекс, утворений комбінацією дигідроетиленгліколю та нуклеїнової кислоти, має високу стабільність і не легко відбілюється або ферментатично гідролізований. Це призводить до хорошої стабільності флуоресценції дигідроетиленгліколю в довгих - термінах, що знаходяться або безперервного моніторингу, що сприятливо для точно оцінювання динамічних змін внутрішньоклітинних аніонів супероксиду.
Використовуючи властивості флуоресценції етилендіаміну, дослідники можуть використовувати методи візуалізації, такі як флуоресцентна мікроскопія або проточна цитометрія для моніторингу та аналізу рівнів внутрішньоклітинних аніонів супероксиду в реальному - часу. Цей метод має переваги високої чутливості, специфічності та високої пропускної здатності -, що забезпечує потужний інструмент для виявлення механізмів реактивних видів кисню в клітинній фізіології та патології.
Дігідроетідій (Dihydroethidium, DHE)-це справді клітина - проникний синій флуоресцентний зонд, який в основному використовується для виявлення супероксидного радикального аніона (O2-) у клітинах. Далі - принцип його виявлення та випадки застосування в біологічних дослідженнях:
Принцип виявлення
DHE може бути дегідрогенізований внутрішньоклітинним аніоном супероксиду для отримання етидію (наприклад, броміду етидію) після прийому живих клітин. Етідій може зв'язуватися з РНК або ДНК для отримання червоної флуоресценції. Коли внутрішньоклітинний рівень аніона супероксиду вищий, виробляється більше етидію, а червона флуоресценція сильніша; І навпаки, це слабкіше. Це дозволяє виявити рівні аніона супероксиду з DHE. У той же час, сам DHE флуоресцує синім у цитоплазмі, поки вона не окислюється, а потім він буде вставлений у клітинну ДНК, фарбуючи ядро яскраво -флуоресцентного червоного кольору.
Приклади застосування
Виявлення вироблення ROS в тканинах печінки: зрізи тканин печінки готують та інкубують з DHE. Потім секції спостерігаються за допомогою флуоресцентного мікроскопа, а відсоток позитивних клітин DHE - обчислюється за допомогою кількісного морфометричного аналізу для оцінки ROS (реактивних видів кисню).
Для вивчення змін антиоксидантних ферментів та статусу окислювально-відновлювального глутатіону клітин CD 34+ у гіпоксичних та нормоксичних станах: У цьому дослідженні супероксид O2 - було позначено за допомогою DHE, а потім проаналізовано за допомогою потоку. Результати показали, що вміст кисню впливав на генерацію супероксиду та перекису, з більш високою швидкістю генерації перекису в нормоксичному стані.
Вищезазначені принципи та випадки застосування показують, що DHE, як флуоресцентний зонд супероксиду, має широкий спектр застосувань у галузі біологічних досліджень. Він може бути використаний не лише для оцінки рівня окислювального стресу в клітинах, але й створення важливої основи для механізму захворювань та розвитку антиоксидантних препаратів.
Кордони в дослідженні
► Дизайн радіоактивних - мічені зонди
Щоб увімкнути динамічне відстеження супероксиду in vivo, дослідники розробили ¹c - похідне DHE. Мінімізуючи структурні модифікації (вводячи атом бромів лише на бензольному кільці), збереглися хімічні та біологічні властивості DHE. ПЕТ -візуалізація виявила, що цей зонд виявляв чотириразовий більший поглинання в ішемічному міокарді порівняно зі здоровою тканиною, показуючи значну кореляцію з інтенсивністю флуоресценції DHE (r =0.92, p<0.001), thereby providing a novel tool for early diagnosis of cardiovascular diseases.
► Розробка мітохондрій - цільових зондів
Для вирішення потреби в виявленні мітохондріального супероксиду дослідники синтезували Mitosox Red (мітохондрії - локалізований аналог DHE). Цей зонд орієнтований на мітохондрії за допомогою трифенілфосфінового фрагмента, при цьому його продукт окислення випромінює помаранчевий - червона флуоресценція (510/580 нм). У моделях хвороби Паркінсона, червоне виявлення мітозоксів виявило, що концентрація супероксиду мітохондріальної суперсисксиду в дофамінергічних нейронах Nigra була підвищена в п'ять разів порівняно з нормальними рівнями, що з’являються раніше, ніж апоптотичні маркери. Це забезпечує біомаркер для раннього втручання в нейродегенеративні захворювання.
Популярні Мітки: Dihydroethidium CAS 104821-25-2, постачальники, виробники, фабрика, оптова торгівля, купівля, ціна, масу, для продажу