Янус Грін Б, англійська назва Janus Green, молекулярна формула C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, являє собою зелений твердий порошок при кімнатній температурі та тиску. Здається, він розчинний у воді, але слабо розчинний у спиртових органічних розчинниках. Він має високу розчинність у воді, особливо коли розчиняється в гарячій воді, і виглядає синім. Він також слабо розчинний у спиртових розчинниках. Ця властивість дозволяє йому швидко дифундувати та фарбувати біологічні зразки. Це спеціальний живий фарбувальний агент, який можна використовувати для живого фарбування мітохондрій, фарбування грибів і найпростіших, фарбування зрізів ембріонів, а також для окисно-відновних індикаторів і мідних гальванічних добавок. Він має гарне застосування в галузях фундаментальних досліджень, таких як біохімія та флуоресцентні барвники. Його молекулярна структура містить азобарвники, що робить його ефективним органічним барвником. Позитивний заряд у його молекулярній структурі також робить його певним застосуванням у гальванічних матеріалах.
|
|
|
|
Хімічна формула |
C30H31ClN6+ |
|
Точна маса |
510 |
|
Молекулярна маса |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Елементний аналіз |
C 70,51; H 6,11; N 16,44; Cl, 6,94 |
Янус Грін Б, як важливий біологічний барвник, має широкий спектр застосування в багатьох сферах.
1. Фарбування мітохондрій in vivo
Найбільш-відоме використання як живий агент для фарбування мітохондрій. Мітохондрії — це «енергетичні фабрики» в клітинах, відповідальні за виробництво енергетичних молекул, таких як АТФ, для підтримки життєдіяльності клітин. Він може спеціально забарвлювати мітохондрії, роблячи їх синьо-зеленими під високо-мікроскопом, тоді як цитоплазма майже безбарвна. Ця характеристика фарбування дозволяє дослідникам чітко спостерігати за розподілом, морфологією та кількістю мітохондрій у клітинах, що має велике значення для вивчення функції, метаболізму та зв’язку із захворюваннями мітохондрій.
2. Забарвлення грибів і найпростіших
Крім мітохондріального фарбування, його також можна використовувати для фарбування грибів і найпростіших. Гриби та найпростіші є важливими об’єктами біологічних і медичних досліджень, а їх морфологія, структура та фізіологічні характеристики мають вирішальне значення для розуміння життєвих процесів і механізмів захворювання. Його фарбувальні властивості полегшують спостереження та ідентифікацію цих крихітних організмів під мікроскопом, забезпечуючи сильну підтримку для відповідних досліджень.
3. Фарбування зрізу ембріона
У дослідженнях біології розвитку та ембріології фарбування зрізів ембріона є важливим засобом розуміння процесу розвитку ембріона та структурних змін. Його можна використовувати для фарбування зрізів ембріонів, щоб допомогти дослідникам спостерігати та аналізувати структуру клітинної тканини та морфологічні характеристики ембріонів на різних стадіях розвитку. Це має велике значення для розуміння механізмів регуляції ембріонального розвитку, виникнення генетичних захворювань і проблем репродуктивного здоров'я.
4. Окисно-відновний показник
Він також виконує функцію індикатора-відновлення окислення. У хімічних реакціях ступені окиснення і відновлення речовин часто супроводжуються зміною кольору. У різних окисно-відновних станах він матиме різні кольори, тому його можна використовувати як індикатор окисно-відновних реакцій. Ця характеристика робить його потенційним застосуванням у таких сферах, як хімічний аналіз, моніторинг навколишнього середовища та харчова промисловість.
Виходячи з 4-аміно-N, N-діетиланіліну або п-фенілендіаміну (містить N,N-діетиланілін), метиленовий фіолетовий 3RAX отримують шляхом циклізації з аніліном у присутності окислювача. ЗгодомЯнус Грін Ботримують діазотуванням і реакцією сполучення.
Вихідний матеріал: припустимо, що ми використовуємо 4-аміно-N, N-діетиланілін як основний вихідний матеріал. Випадок p-фенілендіаміну (містить N,N-діетиланілін) може потребувати додаткових етапів для виділення або синтезу потрібного N,N-діетилзаміщеного p-фенілендіаміну, але тут ми зосереджуємось на випадку однієї вихідної речовини.
Мета: циклізувати 4-аміно-N, N-діетиланілін аніліном або іншими відповідними сполуками з утворенням бензогетероциклічної структури, подібної до метиленового фіолетового 3RAX. Спочатку 4-аміно-N, N-діетиланілін перетворюється на проміжний продукт, який легше циклізується, за допомогою деяких засобів, таких як ацилювання, конденсація тощо, а потім проміжний продукт циклізується аніліном.
Приклад реакції (не прямої, лише для ілюстрації):
Реакція ацилювання (утворення проміжного аміду): 4-аміно-N, N-діетиланілін реагує з ацилхлоридом або ангідридом з утворенням відповідного аміду.
4-аміно-N,N-діетиланілін+ацилхлорид → амідний проміжний продукт+HCl
Кільцева реакція (гіпотеза): амідний проміжний продукт циклізується з аніліном в умовах каталізатора та/або нагрівання.
Проміжний амід+анілін → проміжний продукт, подібний до метиленового фіолетового 3RAX
Мета: переконатися, що проміжний продукт містить ароматичні первинні аміни для наступних реакцій діазотування.
Приклад реакції (якщо проміжна сполука вже є ароматичним первинним аміном, пропустіть цей крок):
Якщо проміжний продукт не є первинним ароматичним аміном, його, можливо, потрібно буде перетворити на первинний ароматичний амін шляхом відновлення, гідролізу або інших реакцій.
Непервинний амінний проміжний продукт + відновник/гідролізатор → ароматичний первинний амінний проміжний продукт
Мета: Перетворення проміжних сполук ароматичного первинного аміну в солі діазонію.
Хімічне рівняння:
Проміжний ароматичний первинний амін+азотиста кислота+кислота → сіль діазонію+вода
Примітка. Реакцію діазотування зазвичай проводять при низьких температурах (наприклад, нижче 0 градусів C) і в кислих умовах, щоб запобігти розкладу солей діазонію.
Мета: поєднання солей діазонію з відповідними фенольними або ароматичними амінними сполуками з утворенням Jianna Green B.
Хімічне рівняння (приклад): солі діазонію+фенольні або ароматичні амінні сполуки → C30H31ClN6+-продукти
Примітка. Реакції сполучення зазвичай проводять у лужних умовах для сприяння утворенню продуктів сполучення. Вибір відповідних фенольних або ароматичних амінних сполук має вирішальне значення для отримання цільового продукту, Jianna Green B.
Додаткові кроки: очищення та пост{0}}обробка
Мета: виділити та очистити Jianna Green B з реакційної суміші.
Метод: це може включати такі методи, як екстракція розчинником, кристалізація, перекристалізація, хроматографічне розділення (наприклад, колонкова хроматографія, тонкошарова хроматографія, ВЕРХ тощо).
Увага: Етапи очищення та подальшої -обробки є вирішальними для отримання цільових продуктів високої-чистоти. У лабораторії ці кроки може знадобитися повторити кілька разів, щоб оптимізувати врожайність і чистоту.
У біологічних експериментах,Янус Грін Бшироко використовується як живий фарбувальний агент для спостереження за морфологією та розподілом мітохондрій. Його унікальні характеристики фарбування дозволяють чітко розрізняти мітохондрії під мікроскопом, що робить його важливим інструментом у дослідженні клітинної біології. Нижче описано, як приготувати 1% якісну фракцію розчину барвника Jianna Green B. Цей процес включає не лише точне зважування та розчинення хімічних реагентів, а й ретельний розгляд таких факторів, як температура та вибір розчинника, щоб гарантувати, що кінцевий розчин барвника є стабільним та ефективним.
|
|
|
|
|
Експериментальна підготовка
Матеріали та реактиви
Порошок Jianna Green B: переконайтеся, що придбаний Jianna Green B має високу чистоту та не містить домішок, що є основою для приготування високо-якісних розчинів барвників.
Фізіологічний розчин. Фізіологічний розчин, також відомий як 0,9% розчин хлориду натрію, часто використовується як розчинник у біологічних експериментах, щоб зменшити пошкодження клітин, оскільки його осмотичний тиск подібний до осмотичного тиску клітин людини. У цьому експерименті фізіологічний розчин використовувався як середовище для розчинення Jianna Green B.
Мірний циліндр: Використовується для точного вимірювання фізіологічного розчину.
Стакан: використовується для розчинення порошку Jianna Green B.
Магнітна мішалка (додатково): використовується для прискорення процесу розчинення та забезпечення рівномірного розподілу порошку в розчиннику.
Датчик температури: використовується для моніторингу та контролю температури під час процесу розчинення.
Електронні ваги: використовуються для точного зважування порошку Jianna Green B.
Мірна колба (необов’язково): якщо потрібна вища точність, для визначення об’єму можна використовувати мірну колбу. Але в цьому простому способі приготування можна безпосередньо використовувати стакан і мірний циліндр.
Коричнева скляна пляшка: використовується для зберігання готового розчину барвника Jianna Green B. Коричнева пляшка може запобігти впливу світла на розчин барвника та зберегти його стабільність.
Захист безпеки
Носіть лабораторні халати: захистіть одяг від хімічного забруднення.
Одягайте рукавички: уникайте прямого контакту шкіри з хімічними реагентами.
Одягніть захисні окуляри: Щоб розчин не потрапив в очі.
Робота у витяжній шафі: Забезпечте циркуляцію повітря в лабораторії та зменшіть накопичення шкідливих газів.
Етапи підготовки
Точно зважте 0,5 г порошку Jianna Green B за допомогою електронних ваг. Зауважте, що ваги необхідно відкалібрувати перед зважуванням, щоб забезпечити точне зважування.
Обережно вилийте зважений порошок Jianna Green B у чистий стакан, щоб порошок не розлетівся.
Точно відміряйте 50 мл фізіологічного розчину за допомогою градуйованого циліндра. Зауважте, що під час вимірювання мірний циліндр слід розташувати на стійкій поверхні так, щоб лінія зору була на одному рівні з найнижчою точкою рівня рідини, щоб забезпечити точне вимірювання.
Повільно влийте відміряний фізіологічний розчин у склянку з порошком Jianna Green B. Зауважте, що його слід наливати повільно вздовж стінки склянки, щоб уникнути розбризкування рідини або утворення великої кількості піни.
Обережно перемішайте розчин скляною паличкою, щоб допомогти розчинити порошок Jianna Green B. Якщо умови дозволяють, для перемішування можна використовувати магнітну мішалку, щоб покращити ефективність розчинення.
Під час перемішування слідкуйте за зміною кольору розчину. Коли Jianna Green B розчиняється, розчин має поступово ставати темно-зеленим або синьо-зеленим.
Через обмежену розчинність Jianna Green B при кімнатній температурі, щоб покращити ефективність розчинення, стакан можна нагріти на водяній бані до 30-40 градусів Цельсія. Зауважте, що температура не повинна бути надто високою під час нагрівання, щоб уникнути пошкодження хімічної структури Jianna Green B або спричинити надмірне випаровування розчинника.
У процесі нагрівання продовжуйте помішувати розчин, поки порошок Jianna Green B повністю не розчиниться і розчин не стане однорідним і прозорим.
Після розчинення перевірте колір і прозорість розчину. Якщо в розчині є нерозчинені частинки або нерівномірний колір, слід продовжувати перемішування або відповідне нагрівання, доки проблема не буде вирішена.
Якщо необхідно відрегулювати концентрацію розчину, кількість фізіологічного розчину або порошку Jianna Green B можна відповідно збільшити або зменшити відповідно до фактичної ситуації. Але в цьому методі приготування ми точно зважили реагент відповідно до масової частки 1%, тому додаткові коригування зазвичай не потрібні.
Налийте готовий розчин барвника Jianna Green B у коричневу скляну пляшку та щільно закрийте кришкою, щоб запобігти забрудненню та випаровуванню.
Позначте на пляшці назву, концентрацію, дату приготування та ім’я користувача розчину барвника для подальшого використання та управління.
Запобіжні заходи
Точне зважування:
Забезпечення точного вимірювання здорового зеленого порошку B і фізіологічного розчину є ключем до приготування високо-якісних розчинів барвників.
01
Контроль температури:
Під час процесу нагрівання слід суворо контролювати температуру, щоб уникнути негативного впливу на якість розчину барвника, викликаного надмірно високими або низькими температурами.
02
Адекватне перемішування:
Перемішування є ключовим кроком у забезпеченні того, щоб зелений порошок B рівномірно розчинився у фізіологічному розчині, і його слід продовжувати, доки розчин не стане однорідним і прозорим.
03
Безпечна експлуатація:
Суворо дотримуйтесь правил безпеки лабораторії протягом усього процесу підготовки, щоб забезпечити особисту безпеку та безпеку експериментального середовища.
04
Своєчасне використання:
Тривале зберігання готового розчину барвника може призвести до зниження його ефекту фарбування або інших хімічних змін. Рекомендується використовувати його якомога швидше після приготування, щоб забезпечити найкращий ефект фарбування.
05
FAQ
1. Що таке Janus Green B?
Janus Green B – це штучно синтезований основний барвник на основі-феназину, який зазвичай використовується для біологічного фарбування (наприклад, живе фарбування мітохондрій) і як індикатор-відновлення окислення.
2. Які основні цілі?
В основному використовується в біологічних експериментах:
- Живе фарбування мітохондрій (оскільки внутрішня мембранна система мітохондрій може відновити їх до безбарвного стану, виявляючи їх окисно-відновну активність).
- Виявлення клітинного дихання (як індикатор окиснення-відновлення, синій колір позначає окиснений стан, а безбарвний — відновлений стан).
- Його також можна використовувати як барвник для шовку та шкіри в промисловості.
3. Який принцип фарбування?
У мітохондріях Janus Green B відновлюється до безбарвного продукту ферментами внутрішньої мембрани (такими як цитохром-с-оксидаза) всередині мітохондрій; після виходу з мітохондрій він повторно -окислюється киснем до синього кольору. Ця оборотна окисно-відновна реакція дозволяє конкретно вказувати на активність мітохондрій.
4. На що слід звернути увагу при використанні?
- Необхідно контролювати концентрацію барвника та час (зазвичай 0,01%-0,02%), щоб уникнути надмірного фарбування, яке може перешкоджати активності клітин.
- Для деяких типів клітин ефект фарбування може бути незадовільним. Треба оптимізувати умови.
- Зберігайте в темному та герметично закритому контейнері, щоб запобігти розкладанню.
Популярні Мітки: janus green b cas 2869-83-2, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продаж