Порошок агарозице органічна речовина з хімічною формулою c24h38o19. Це біла або жовта кулька, схожа на гелеподібну частинку або порошок, який є лінійним полімером, а основна структура 1,3-зв’язаної - D-галактози та 1,4-зв’язаної 3,6{{12}ендоефір-1-галактози по черзі.
Агаровий пектин — це неоднорідна суміш, що складається з багатьох менших молекул. Зазвичай агарозу нагрівають до температури вище 90 градусів для розчинення у воді, а коли температура падає до 35-40 градусів, вона утворює хороший напівтвердий гель, що є головною особливістю та основою її різноманітного використання. Ефективність агарозного гелю зазвичай виражається міцністю гелю. Чим вища міцність, тим краще діє гель.
Порошок агарози, скорочено Ag, є незарядженим нейтральним компонентом агару, також перекладається як агароза або агароза. Хімічна структура агарози пов’язана 1,3 - D-галактозою та 1,4-зв’язаною 3,6-ендоефір-1-галактозою по черзі.
Агароза одержується з полісахариду червоних водоростей, і її основним компонентом є полігалактоза, з якої приблизно 70% становить агароза, а 30% - агароза з розгалуженим ланцюгом. Агароза має лінійну структуру і передається D-галактозою та 3,6-зневодненою галактозою - 1, 4 і - 1, 3 з’єднання по черзі утворюють повторювані дисахаридні одиниці. Агарозу з розгалуженим ланцюгом екстрагували з - 1, 3 зв’язки відокремлюють інший ланцюг. Матеріал, витягнутий з морських водоростей гарячою водою, містить близько 40% агару. Комерційно доступний агар (широко відомий як агар) часто має форму листа або мотузки і зазвичай використовується як їстівна гумка, засіб для упаковки ліків або середовище для бактеріальної культури. Чисту агарозу часто використовують у біохімічних лабораторіях як напівтверду основу в електрофорезі, хроматографії та інших технологіях для розділення та аналізу біологічних макромолекул або малих молекул.
Процес виробництва агарози можна розділити на чотири частини: попередня обробка, екстракція, обробка целюлози DEAE та дегідратація
1) Попередньо оброблену порошкоподібну сировину безпосередньо сушать при 80C протягом 1/2 години. стрічкову і блочну сировину промивають водою, нарізають дрібними шматочками і запікають
2) Екстракція: після перемішування та екстрагування розчином змішаного ефіру ацетату натрію оцтової кислоти протягом кількох годин видаліть воду відсмоктуванням, промийте, потім перемішайте та екстрагуйте буферним розчином карбонату натрію і бікарбонату натрію протягом кількох годин, а потім прокачайте, відфільтруйте та промийте водою
3) Агаровий гель, екстрагований буферним розчином, розчиняють у 4% розчині шляхом нагрівання з водою, а потім додають целюлозу DEAE для перемішування протягом 3-4 годин при збереженні тепла, а потім центрифугують. Фільтрат збирають і фільтрують до отримання білого розчину в колоїдному стані
4) Дегідратація: після нагрівання білого фільтрату швидко додайте 95% етанол, перемішуючи, доки не випаде явний осад, охолодіть до кімнатної температури, вилийте верхній шар розчину, промийте та висушіть осад для отримання продукту з виходом 71%.
Відновлення реагенту. Відновлення целюлози DEAE: після центрифугування осад кип’ятять з водою, фільтрують на шовковій тканині 100 меш, повторюють кілька разів, доки фільтрат не стане прозорим, потім промивають 0,5 моль/1 HCl, 0,5 моль/1 NaOH і водою та сушать. Швидкість відновлення становить 95%. Фракцію при 80°C збирали прямою дистиляцією етанольного водного розчину, виділеного з водного розчину Ічунь. Потім додайте твердий хлорид натрію до насичення та продовжуйте дистиляцію. 70% можна завантажити. Після випаровування хлориду натрію в пляшці його також можна зарядити за допомогою клапана.
Порошок агарозиє полісахаридом, який видобувається з морських водоростей і є основним компонентом агару. З моменту свого відкриття він широко використовувався в багатьох галузях завдяки своїм унікальним фізичним і хімічним властивостям, таким як здатність до гелеутворення, термостабільність, хімічна стабільність і біосумісність. Нижче наведено детальне пояснення його призначення:
Електрофорез у агарозному гелі є одним із найбільш часто використовуваних методів розділення та аналізу в молекулярній біології. Як середовище гель-електрофорезу агароза має переваги великого розміру пор, широкого діапазону розділення та простоти експлуатації. У процесі електрофорезу біологічні макромолекули, такі як ДНК, РНК або білок, мігрують через пори агарозного гелю під дією електричного поля. Через різницю в заряді, розмірі та формі різних молекул швидкість їх міграції в гелі різна, таким чином досягаючи розділення. Електрофорез у агарозному гелі широко використовується для клонування генів, аналізу експресії генів і виявлення генних мутацій. Він зазвичай використовується як опора або матриця в культурі клітин. Завдяки чудовій біосумісності та хімічній стабільності агароза може забезпечити стабільне середовище для росту клітин. Наприклад, в експерименті з формування колоній у м’якому агарі агарозу використовують для приготування напів-твердого культурального середовища для виявлення здатності клітин до колонієутворення, що має велике значення для оцінки ступеня злоякісної трансформації клітин.
Крім того, агарозу також можна комбінувати з іншими біоматеріалами для виготовлення композитних каркасних матеріалів для використання в тканинній інженерії та регенеративній медицині. Агарозний гель також відіграє важливу роль в імунодифузії та імуноелектрофорезі. У цих технологіях агарозний гель, як середовище реакції антигену та антитіла, може утворювати чіткі лінії преципітації або кільця, які можна використовувати для виявлення та аналізу присутності та концентрації антигену чи антитіла. Розмір пор і властивість заряду агарозного гелю можуть впливати на швидкість дифузії та ефективність зв’язування антигену та антитіла, тому умови експерименту можна оптимізувати, регулюючи концентрацію та тип агарози.
Застосування в експериментах з молекулярної біології
Електрофорез у агарозному гелі можна використовувати не тільки для розділення ДНК і РНК, але й поєднувати з іншими технологіями для досягнення їх очищення. Наприклад, у процесі екстракції ДНК можна використовувати електрофорез у агарозному гелі для виявлення цілісності та чистоти ДНК, а потім цільовий сегмент ДНК можна відокремити від гелю шляхом розрізання та відновлення гелю. Перевагами цього методу є простота експлуатації та висока швидкість відновлення. В експериментах з гібридизації нуклеїнових кислот агарозний гель можна використовувати як твердофазний носій для фіксації зондів ДНК або РНК на гелі, а потім гібридизувати з міченою цільовою нуклеїновою кислотою. Шляхом виявлення присутності та інтенсивності сигналів гібридизації можна визначити присутність і концентрацію цільових нуклеїнових кислот.
Розмір пор і властивість заряду агарозного гелю можуть впливати на ефективність зв’язування зонда та цільової нуклеїнової кислоти, тому умови гібридизації можна оптимізувати, регулюючи концентрацію та тип агарози. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) є одним із найбільш часто використовуваних методів у молекулярній біології для ампліфікації ДНК. При аналізі продуктів ПЛР електрофорез у агарозному гелі є одним із найбільш часто використовуваних методів. Відокремлюючи продукти ПЛР за допомогою електрофорезу, можна визначити розмір і чистоту ампліфікованих фрагментів, таким чином визначаючи, чи була реакція ПЛР успішною та чи існують не-специфічні проблеми ампліфікації.
Незважаючи на те, що розмір пор агарозного гелю відносно великий, він не підходить для поділу маломолекулярних білків, але в деяких випадках його можна використовувати для поділу та очищення білка. Наприклад, у препаративному гель-електрофорезі агарозний гель можна використовувати для розділення та очищення білків з більшою молекулярною масою. Крім того, агарозу також можна комбінувати з іншими матеріалами для приготування композитного гелю, щоб розширити його діапазон поділу та підвищити ефективність поділу. У деяких експериментах з визначення активності ферменту агарозний гель можна використовувати як носій для іммобілізації ферменту. Іммобілізація ферменту на агарозному гелі може підтримувати активність і стабільність ферменту та полегшувати відділення та відновлення ферменту від реагентів. Цей метод має широке застосування в галузі ферментної інженерії.
Застосування в мікробіології
Агароза зазвичай використовується як коагулянт у мікробних культуральних середовищах. У порівнянні з агаром, агароза має вищу чистоту та менший вміст домішок, що робить її більш придатною для культивування мікробів. Готуючи тверде культуральне середовище, розчиніть агарозу в гарячій воді, потім додайте інші поживні речовини та антибіотики та охолодіть, щоб утворилося тверде культуральне середовище. Цей тип культурального середовища може забезпечити стабільне середовище для росту мікроорганізмів, полегшуючи їх виділення, очищення та ідентифікацію. В експериментах з мікробіологічної ідентифікації агарозний гель можна використовувати для приготування специфічних ідентифікаційних середовищ. Наприклад, при ідентифікації кишкових бактерій агарозне культуральне середовище, що містить специфічні цукри, можна використовувати для розрізнення різних типів бактерій шляхом спостереження за їх бродінням цукрів. Крім того, агарозний гель також можна використовувати для приготування біохімічних реакційних середовищ для мікроорганізмів для виявлення їхніх метаболічних характеристик і активності ферментів.
Порошок агарозизазвичай нагрівається до температури понад 90 градусів для розчинення у воді, а коли температура падає до 35-40 градусів, він утворює хороший напівтвердий гель, що є головною особливістю та основою його різноманітного використання. Ефективність агарозного гелю зазвичай виражається міцністю гелю. Чим вища міцність, тим краще діє гель. Гель агарози зумовлений існуванням водневих зв’язків. Будь-який фактор, який може зруйнувати водневі зв'язки, може призвести до руйнування гелю. Агароза гідрофільна і майже повністю вільна від заряджених груп. Він рідко викликає денатурацію та адсорбцію на чутливих біологічних макромолекулах. Це ідеальний інертний носій. У процесі приготування агарози необхідно максимально видалити пектин з агару, інакше може бути дуже невелика кількість сульфату та піровиноградної кислоти для заміни іонізуючої групи в агарозі, що спричинить електроосмос (EEO) і вплине на рух частинок. Вміст сульфату в агарозі хорошої якості відносно низький, зазвичай нижче 0,2%, а електроосмос відносно невеликий, зазвичай нижче 0,13. Ось чому агароза така дорожча, ніж агар.
У 1937 році Аракі вперше відокремив агарозу від агару, але лише в 1961 році Hjertin вперше виявив чудові властивості агарози, що привернуло все більше уваги та почало промислове виробництво. Агароза широко використовується в клінічних випробуваннях, біохімічному аналізі та розділенні біомакромолекул.
Порошок агарози є фундаментальним інструментом у молекулярній біології та біотехнології з широким спектром застосувань у гель-електрофорезі, афінній хроматографії, імунодифузії та імуноелектрофорезі. Його унікальні властивості, такі як простота використання, універсальність, низька токсичність і-рентабельність, роблять його незамінним компонентом лабораторних досліджень. Незважаючи на обмеження, такі як обмежена роздільна здатність і крихкість, нещодавні досягнення в технології агарозного гелю, включаючи гелі з високою-роздільністю, попередньо-гелі та мікрофлюїдні пристрої на основі агарози-, розширили його корисність і покращили його продуктивність. Оскільки наукові дослідження продовжують розвиватися, порошок агарози, безсумнівно, залишатиметься цінним і важливим реагентом у наборі інструментів молекулярної біології та біотехнології.
Популярні Мітки: порошок агарози cas 9012-36-6, постачальники, виробники, фабрика, опт, купити, ціна, оптом, продаж