ІПТГ, CAS 367-93-1, хімічна структура, що складається з ізопропілу. Він складається з D-тіогалактозидних і фосфатних груп. Серед них - D-тіогалактозид - аналог галактози, в якому атом сірки заміщає атом кисню. Ця особлива глікозидна структура дозволяє IPTG зв’язуватися з ДНК і індукувати експресію генів. IPTG має низьку розчинність у воді, але може добре розчинятися у фізіологічному розчині та фосфатному буфері. Він кислий зі значенням pKa 4,5, що пов’язано з фосфатною групою в його молекулярній структурі. Його непросто кристалізувати в чистій воді, але він може утворювати кристали в розчинах високої концентрації або при додаванні інших сполук. Завдяки своїй здатності індукувати експресію бактеріального білка IPTG чутливий до певних мікроорганізмів. Наприклад, деякі бактерії можуть припинити ріст або загинути після впливу IPTG.
(Посилання на продукт 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html ）
(Посилання на продукт 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Ферментативний синтез IPTG – це метод, який використовує ферменти для каталізації реакції галактози та уридинтрифосфату для отримання ізопропілових груп- - Метод для D-тіогалактозиду. Нижче наведено детальні етапи та хімічні рівняння цього методу:
1. Підготовчі роботи:
Підготуйте необхідні реагенти та обладнання, включаючи галактозу, уридинтрифосфат, ферменти, буфер, реакційні контейнери, регулятори температури тощо.
Додайте в реакційну посудину галактозу та уридинтрифосфат у певній пропорції.
Додайте відповідну кількість ферменту та буфера для підтримки стабільності рН реакційної системи.
Помістіть реакційний контейнер у терморегулятор і встановіть відповідну температуру реакції.
2. Процес реакції
2.1 Рівномірно перемішайте реакційну систему при відповідній температурі.
2.2 Підтримуйте стабільність температури та pH реакційної системи та продовжуйте перемішувати.
2.3 Відбір проб і тестування ізопропілу через регулярні проміжки часу- - Виробництво D-тіогалактозиду.
2.4 Відрегулюйте дозування ферменту та час реакції на основі результатів тесту, щоб отримати найкраще утворення D-тіогалактозиду ізопропілової групи- -.
3. Хімічне рівняння
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6бр4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Серед них АТФ являє собою аденозинтрифосфат, UDP являє собою уридиндифосфат, а Pi являє собою неорганічний фосфор. Це хімічне рівняння відображає утворення ізопропілових груп із галактози та уридинтрифосфату під дією ферментів- - D-тіогалактозиду та АДФ, а також Пі.
4. Розділення та очищення
Після завершення реакції реакційний розчин фільтрують або центрифугують для видалення галактози, що не прореагувала, уридинтрифосфату та інших домішок.
Використання відповідних методів розділення та очищення, таких як іонний обмін, хроматографія тощо, для подальшого очищення ізопропіл- - D-тіогалактозиду.
Проведіть перевірку якості, наприклад високоефективну рідинну хроматографію, мас-спектрометрію тощо, щоб переконатися, що якість продукції відповідає вимогам.
5. Підведення підсумків
Ферментативний метод синтезу ІПТГ відрізняється високою селективністю, виходом і чистотою, а також екологічністю і високою безпекою. У цьому методі тип, концентрація, значення рН, температура та інші умови ферменту мають значний вплив на результати реакції, і потрібен точний контроль і регулювання. Крім того, етапи розділення та очищення також мають вирішальне значення для забезпечення якості та чистоти продукту. У практичній роботі слід вносити коригування та оптимізацію відповідно до конкретних обставин, щоб отримати найкращу ізопропілову групу- - Виробництво та якість D-тіогалактозиду.
Метод багатокомпонентної реакції IPTG — це реакція, яка використовує участь багатьох компонентів для синтезу ізопропіл- - методу для D-тіогалактозиду. Нижче наведено детальні етапи та хімічні рівняння цього методу:
1. Підготовча робота
Підготуйте необхідні реагенти та обладнання, включаючи галактозу, уридинтрифосфат, аденозинтрифосфат, натрію тіосульфат, ферменти, буфер, реакційні контейнери, регулятори температури тощо.
Додайте в реакційну посудину галактозу, уридинтрифосфат, аденозинтрифосфат і натрій тіосульфат у певній пропорції.
Додайте відповідну кількість ферменту та буфера для підтримки стабільності рН реакційної системи.
Помістіть реакційний контейнер у терморегулятор і встановіть відповідну температуру реакції.
2. Процес реакції
2.1 Рівномірно перемішайте реакційну систему при відповідній температурі.
2.2 Підтримуйте стабільність температури та pH реакційної системи та продовжуйте перемішувати.
Під час процесу реакції слід приділяти увагу спостереженню за перебігом реакції, своєчасному регулюванню кількості ферменту та часу реакції, щоб отримати найкраще виробництво ізопропілової групи - - D-тіогалактозиду.
3. Хімічне рівняння
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6бр4O2 + C3H7N
Серед них АТФ являє собою аденозинтрифосфат, UDP являє собою уридиндифосфат, АДФ являє собою аденозиндифосфат, а Pi являє собою неорганічний фосфор. Це хімічне рівняння відображає утворення ізопропільних груп із галактози, уридинтрифосфату та аденозинтрифосфату під дією ферментів- - D-тіогалактозиду та Pi.
4. Розділення та очищення
Після завершення реакції реакційний розчин фільтрують або центрифугують для видалення галактози, що не прореагувала, уридинтрифосфату, аденозинтрифосфату та інших домішок.
Використання відповідних методів розділення та очищення, таких як іонний обмін, хроматографія тощо, для подальшого очищення ізопропіл- - D-тіогалактозиду.
Проведіть перевірку якості, наприклад високоефективну рідинну хроматографію, мас-спектрометрію тощо, щоб переконатися, що якість продукції відповідає вимогам.
5. Підведення підсумків
Метод багатокомпонентної реакції IPTG використовує переваги кількох компонентів, які разом беруть участь у реакції, з високою селективністю, виходом і чистотою. У цьому методі, на додаток до основної сировини, такої як галактоза, уридинтрифосфат і ферменти, також додаються допоміжні компоненти, такі як аденозинтрифосфат і тіосульфат натрію, щоб сприяти реакції і покращувати якість продукту. Крім того, етапи розділення та очищення також мають вирішальне значення для забезпечення якості та чистоти продукту. У практичній роботі слід вносити коригування та оптимізацію відповідно до конкретних обставин, щоб отримати найкращу ізопропілову групу- - Виробництво та якість D-тіогалактозиду. У той же час слід звернути увагу на контроль умов реакції, таких як температура, значення pH і дозування ферменту, щоб досягти найкращого ефекту реакції.